فنگسائيڊ سپليمينٽيشن اڪيلي ميسن مکين ۾ خالص توانائي جي حاصلات ۽ مائڪرو بائيوم تنوع کي گھٽائي ٿي.

Nature.com تي اچڻ لاءِ مهرباني. توهان جي استعمال ڪيل برائوزر جي ورزن ۾ محدود CSS سپورٽ آهي. بهترين نتيجن لاءِ، اسان سفارش ڪريون ٿا ته توهان پنهنجي برائوزر جو نئون ورزن استعمال ڪريو (يا انٽرنيٽ ايڪسپلورر ۾ مطابقت واري موڊ کي غير فعال ڪريو). ساڳئي وقت، جاري سپورٽ کي يقيني بڻائڻ لاءِ، اسان سائيٽ کي اسٽائلنگ يا جاوا اسڪرپٽ کان سواءِ ڏيکاري رهيا آهيون.
ڦڦڙن جون دوائون اڪثر ڪري وڻن جي ميوي جي گلن دوران استعمال ڪيون وينديون آهن ۽ جيتن جي جرگ کي خطرو ڪري سگهن ٿيون. تنهن هوندي به، ان بابت ٿورو ئي ڄاڻ آهي ته غير مکي جي جرگ ڪيئن گلن دوران سيب تي عام طور تي استعمال ٿيندڙ رابطي ۽ سسٽماتي فنگسائيڊز جو جواب ڏين ٿا. هي علم جي فرق فنگسائيڊ اسپري ڪرڻ جي محفوظ ڪنسنٽريشن ۽ وقت کي طئي ڪرڻ واري ريگيوليٽري فيصلن کي محدود ڪري ٿو. اسان ٻن رابطي جي فنگسائيڊز (ڪيپٽن ۽ مينڪوزيب) ۽ چار انٽرليئر/فائيٽوسسٽم فنگسائيڊز (سيپروسائيڪلين، مائيڪلوبوٽانيل، پائروسٽروبن ۽ ٽرائيفلوڪسيسٽروبن) جي اثرات جو جائزو ورتو. لاروا جي وزن ۾ واڌ، بقا، جنس جي تناسب ۽ بيڪٽيريا جي تنوع تي اثر. تشخيص هڪ دائمي زباني بايو ايسي استعمال ڪندي ڪئي وئي جنهن ۾ جرگ جو علاج ٽن دوائن ۾ ڪيو ويو جنهن ۾ فيلڊ استعمال لاءِ موجوده سفارش ڪيل دوز (1X)، اڌ دوز (0.5X) ۽ گهٽ دوز (0.1X) جي بنياد تي ڪيو ويو. مينڪوزيب ۽ پائريٽسولائن جي سڀني دوزن جسم جي وزن ۽ لاروا جي بقا کي خاص طور تي گهٽايو. پوءِ اسان 16S جين کي ترتيب ڏنو ته جيئن مينڪوزيب جي لاروا بيڪٽيريوم کي نمايان ڪري سگهجي، جيڪو سڀ کان وڌيڪ موت جو ذميوار فنگسائيڊ آهي. اسان ڏٺو ته مينڪوزيب سان علاج ٿيل پولن تي کارايل لاروا ۾ بيڪٽيريا جي تنوع ۽ ڪثرت ۾ خاص طور تي گهٽتائي آئي. اسان جي ليبارٽري جا نتيجا ظاهر ڪن ٿا ته گلن جي دوران انهن فنگسائيڊ مان ڪجهه کي اسپري ڪرڻ خاص طور تي O. ڪارنيفرون جي صحت لاءِ نقصانڪار آهي. هي معلومات ميوي جي وڻن جي حفاظت جي شين جي پائيدار استعمال جي حوالي سان مستقبل جي انتظامي فيصلن لاءِ لاڳاپيل آهي ۽ پولينٽر جي حفاظت لاءِ ضابطي جي عملن جي بنياد طور ڪم ڪري ٿي.
اڪيلي ميسن مکي اوسميا ڪارنيفرون (هائيمينوپٽيرا: ميگاچليڊي) 1970 جي ڏهاڪي جي آخر ۽ 1980 جي شروعات ۾ جاپان کان آمريڪا ۾ متعارف ڪرايو ويو، ۽ ان نسل ان وقت کان منظم ماحولياتي نظام ۾ هڪ اهم پولينٽر ڪردار ادا ڪيو آهي. هن مکي جي قدرتي آبادي جهنگلي مکين جي تقريبن 50 قسمن جو حصو آهي جيڪي آمريڪا ۾ بادام ۽ سيب جي باغن کي پولينيٽ ڪندڙ مکين کي پورو ڪن ٿيون 2,3. ميسن مکين کي ڪيترن ئي چئلينجن کي منهن ڏيڻو پوي ٿو، جن ۾ رهائش جي ٽڪراءُ، پيٿوجنز، ۽ ڪيڙا مار دوائون شامل آهن 3,4. حشرات جي دوائن ۾، فنگسائيڊ توانائي حاصل ڪرڻ، چارا حاصل ڪرڻ 5 ۽ جسم جي حالت 6,7 کي گهٽائي ٿو. جيتوڻيڪ تازي تحقيق مان معلوم ٿئي ٿو ته ميسن مکين جي صحت سڌي طرح ڪمنسل ۽ ايڪٽوبيٽڪ مائڪروجنزمن کان متاثر ٿئي ٿي، 8,9 ڇاڪاڻ ته بيڪٽيريا ۽ فنگس غذائيت ۽ مدافعتي ردعمل کي متاثر ڪري سگهن ٿا، ميسن مکين جي مائڪروبيل تنوع تي فنگسائيڊ جي نمائش جا اثر صرف مطالعي ٿيڻ شروع ٿي رهيا آهن.
باغن ۾ گلن کان اڳ ۽ دوران مختلف اثرن وارا فنگسائيڊ (رابطي ۽ سسٽماتي) اسپري ڪيا ويندا آهن ته جيئن سيب جي خارش، ڪڪڙ جي سڙي، ڀوري سڙي ۽ پائوڊري ملڊيو 10,11 جهڙين بيمارين جي علاج لاءِ. فنگسائيڊ کي پولينٽر لاءِ بي ضرر سمجهيو ويندو آهي، تنهن ڪري انهن کي گلن جي دور ۾ باغبانن کي سفارش ڪئي ويندي آهي؛ مکين پاران انهن فنگسائيڊز جي نمائش ۽ استعمال نسبتاً مشهور آهي، ڇاڪاڻ ته اهو آمريڪي ماحولياتي تحفظ واري ايجنسي ۽ ڪيترن ئي ٻين قومي ريگيوليٽري ايجنسين پاران جراثيم ڪش رجسٽريشن جي عمل جو حصو آهي 12,13,14. جڏهن ته، غير مکين تي فنگسائيڊز جا اثر گهٽ مشهور آهن ڇاڪاڻ ته اهي آمريڪا ۾ مارڪيٽنگ اختيار جي معاهدن جي تحت گهربل نه آهن 15. ان کان علاوه، عام طور تي اڪيلو مکين جي جانچ لاءِ ڪو به معياري پروٽوڪول ناهي 16,17، ۽ ڪالونين کي برقرار رکڻ جيڪي جانچ لاءِ مکيون مهيا ڪن ٿيون 18. جهنگلي مکين تي جراثيم ڪش جي اثرن جو مطالعو ڪرڻ لاءِ يورپ ۽ آمريڪا ۾ مختلف منظم مکين جا تجربا وڌي رهيا آهن، ۽ تازو ئي O. cornifrons19 لاءِ معياري پروٽوڪول تيار ڪيا ويا آهن.
سڱن واريون مکيون مونوسائيٽس آهن ۽ ڪارپ فصلن ۾ ماکي جي مکين جي اضافي يا متبادل طور تي تجارتي طور تي استعمال ٿينديون آهن. اهي مکيون مارچ ۽ اپريل جي وچ ۾ نڪرنديون آهن، جن ۾ وقت کان اڳ نر مادين کان ٽي کان چار ڏينهن اڳ نڪرندا آهن. ملن کان پوءِ، مادي فعال طور تي پولن ۽ امرت گڏ ڪندي آهي ته جيئن ٽيوبلر نيسٽ ڪيفي (قدرتي يا مصنوعي) اندر بروڊ سيلز جو هڪ سلسلو مهيا ڪري سگهجي. انڊا سيلز اندر پولن تي رکيا ويندا آهن؛ پوءِ مادي ايندڙ سيل تيار ڪرڻ کان اڳ مٽيءَ جي ڀت ٺاهيندي آهي. پهرين انسٽار لاروا ڪوريون ۾ بند ٿيل آهن ۽ جنين جي رطوبتن کي کارائيندا آهن. ٻئي کان پنجين انسٽار (پريپوپا) تائين، لاروا پولن 22 تي کارائيندا آهن. هڪ ڀيرو پولن جي فراهمي مڪمل طور تي ختم ٿي ويندي آهي، لاروا ڪوڪون ٺاهيندا آهن، پيوپيٽ ڪندا آهن ۽ ساڳئي بروڊ چيمبر ۾ بالغن جي طور تي نڪرندا آهن، عام طور تي اونهاري جي آخر ۾ 20،23. بالغ ايندڙ بهار ۾ نڪرندا آهن. بالغن جي بقا کاڌي جي استعمال جي بنياد تي خالص توانائي جي واڌ (وزن ۾ واڌ) سان لاڳاپيل آهي. اهڙيءَ طرح، پولن جي غذائي معيار، انهي سان گڏ ٻيا عنصر جهڙوڪ موسم يا جراثيم ڪش جي نمائش، بقا ۽ صحت جا تعين ڪندڙ آهن 24.
گل پوکڻ کان اڳ لاڳو ڪيل حشرات مار دوائون ۽ فنگسائيڊ ٻوٽن جي ويسڪوليچر اندر مختلف درجن تائين منتقل ٿيڻ جي قابل آهن، ٽرانسليمينار کان (مثال طور، پنن جي مٿئين مٿاڇري کان هيٺئين سطح تائين منتقل ٿيڻ جي قابل، ڪجهه فنگسائيڊ وانگر) 25 تائين.، جيڪي جڙڙن مان تاج ۾ داخل ٿي سگهن ٿا، سيب جي گلن جي امرت ۾ داخل ٿي سگهن ٿا 26، جتي اهي بالغ O. ڪارنيفرون کي ماري سگهن ٿا 27. ڪجهه جراثيم ڪش جرگ ۾ به داخل ٿين ٿا، مڪئي جي لاروا جي ترقي کي متاثر ڪن ٿا ۽ انهن جي موت جو سبب بڻجن ٿا 19. ٻين مطالعي مان ظاهر ٿيو آهي ته ڪجهه فنگسائيڊ لاڳاپيل نسل O. lignaria 28 جي آکيري جي رويي کي خاص طور تي تبديل ڪري سگهن ٿا. ان کان علاوه، ليبارٽري ۽ فيلڊ مطالعي ۾ جراثيم ڪش جي نمائش جي منظرنامي (فنگسائيڊ سميت) جي نقل ڪئي وئي آهي ته جراثيم ڪش ماکي جي مکين ۽ ڪجهه اڪيلائي مکين جي فزيالوجي 22 مورفولوجي 29 ۽ بقا تي منفي اثر وجهن ٿا. گل پوکڻ دوران کليل گلن تي سڌو سنئون لاڳو ڪيل مختلف فنگسائيڊل اسپري بالغن پاران لاروا جي ترقي لاءِ گڏ ڪيل جرگ کي آلوده ڪري سگهن ٿا، جن جا اثر اڃا تائين مطالعي هيٺ آهن 30.
اهو وڌيڪ تسليم ڪيو پيو وڃي ته لاروا جي ترقي هاضمي جي نظام جي پولن ۽ مائڪروبيل برادرين کان متاثر ٿيندي آهي. ماکي جي مائڪروبيوم جسم جي وزن 31، ميٽابولڪ تبديلين 22 ۽ پيٿوجنز جي حساسيت 32 جهڙن پيرا ميٽرز کي متاثر ڪري ٿو. پوئين مطالعي ۾ اڪيلائي واري مکين جي مائڪروبيوم تي ترقي جي مرحلي، غذائي اجزاء ۽ ماحول جي اثر جو جائزو ورتو ويو آهي. انهن مطالعي ۾ اڪيلائي واري مکين جي نسلن ۾ لاروا ۽ پولن مائڪروبيوم 33، انهي سان گڏ سڀ کان عام بيڪٽيريا جي نسل Pseudomonas ۽ Delftia جي جوڙجڪ ۽ گهڻائي ۾ هڪجهڙائي ظاهر ڪئي وئي. جيتوڻيڪ، جيتوڻيڪ فنگسائيڊس کي مکين جي صحت کي بچائڻ لاءِ حڪمت عملين سان لاڳاپيل ڪيو ويو آهي، سڌو سنئون زباني نمائش ذريعي لاروا مائڪروبيوٽا تي فنگسائيڊس جا اثر اڻڄاتل آهن.
هن مطالعي ۾ آمريڪا ۾ وڻن جي ميوي تي استعمال لاءِ رجسٽر ٿيل ڇهن عام طور تي استعمال ٿيندڙ فنگسائيڊز جي حقيقي دنيا جي دوائن جي اثرات جي جانچ ڪئي وئي، جنهن ۾ آلوده کاڌي مان مکڻ جي هارن ورم مٿ لاروا کي زباني طور تي ڏنل رابطي ۽ سسٽماتي فنگسائيڊ شامل آهن. اسان ڏٺو ته رابطي ۽ سسٽماتي فنگسائيڊ مکي جي جسم جي وزن ۾ واڌ ۽ موت جي شرح ۾ اضافو ڪيو، مينڪوزيب ۽ پائريٿيوپائيڊ سان لاڳاپيل سڀ کان وڌيڪ سخت اثرات سان. پوءِ اسان مينڪوزيب سان علاج ڪيل پولن غذا تي کارايل لاروا جي مائڪروبيل تنوع جو مقابلو ڪنٽرول غذا تي کارايل لاروا سان ڪيو. اسان موت جي بنيادي ممڪن طريقن ۽ انٽيگريٽيڊ پيسٽ ۽ پولينيٽر مئنيجمينٽ (IPPM)36 پروگرامن لاءِ اثرن تي بحث ڪريون ٿا.
بالغ O. ڪارنيفرون جيڪي ڪوڪون ۾ سياري گذاري رهيا هئا، اهي بگلر ويل، پي اين جي فروٽ ريسرچ سينٽر مان حاصل ڪيا ويا ۽ −3 کان 2°C (±0.3°C) تي ذخيرو ڪيا ويا. تجربي کان اڳ (ڪل 600 ڪوڪون). مئي 2022 ۾، 100 O. ڪارنيفرون ڪوڪون روزانو پلاسٽڪ جي پيالن ۾ منتقل ڪيا ويا (50 ڪوڪون في پيالو، DI 5 سينٽي × 15 سينٽي ڊگهو) ۽ وائپس کي پيالن جي اندر رکيو ويو ته جيئن کولڻ کي فروغ ڏئي سگهجي ۽ هڪ چبائي سگهجي ٿو، پٿريلي مکين تي دٻاءُ گهٽجي وڃي37. ڪوڪون تي مشتمل ٻه پلاسٽڪ پيالا هڪ ڪيڙن جي پنجري ۾ رکو (30 × 30 × 30 سينٽي ميٽر، بگ ڊورم ميگا ويو سائنس ڪمپني لميٽيڊ، تائيوان) 10 ملي ليٽر فيڊرز سان جنهن ۾ 50٪ سوڪروز محلول هجي ۽ بند ڪرڻ ۽ ميلاپ کي يقيني بڻائڻ لاءِ چار ڏينهن تائين ذخيرو ڪريو. 23 °C، نسبتي نمي 60٪، فوٽو پيريڊ 10 l (گهٽ شدت): 14 ڏينهن. سيب جي گلن جي چوٽي دوران ٻن مصنوعي آکيرن ۾ ڇهن ڏينهن تائين (روزانو 100) هر صبح 100 ملائي مادي ۽ نر ڇڏيا ويا (ٽريپ آکيرو: ويڪر 33.66 × اوچائي 30.48 × ڊيگهه 46.99 سينٽي ميٽر؛ ضمني شڪل 1). پينسلوانيا اسٽيٽ آربوريٽم ۾ رکيل، چيري جي ويجهو (پرونس سيراسس 'يوبينڪ' سويٽ چيري پائي™)، آڑو (پرونس پرسيڪا 'ڪنٽينڊر')، پرونس پرسيڪا 'PF 27A' فليمين فيوري®)، ناشپاتي (پائرس پيري فوليا 'اولمپڪ'، پيرس پيري فوليا 'شنڪو'، پيرس پيري فوليا 'شنسيڪي')، ڪورونريا ايپل ٽري (مالس ڪورونريا) ۽ سيب جي وڻن جون ڪيتريون ئي قسمون (مالس ڪورونريا، مالس)، گهريلو سيب جو وڻ 'ڪو-اوپ 30′ انٽرپرائز™، مالس ايپل ٽري 'ڪو-اوپ 31′ وائن ڪرسپ™، بيگونيا 'فريڊم'، بيگونيا 'گولڊن ڊيليشس'، بيگونيا 'نووا اسپائي'). هر نيرو پلاسٽڪ برڊ هائوس ٻن ڪاٺ جي دٻن جي مٿان فٽ ٿئي ٿو. هر نيسٽ باڪس ۾ 800 خالي ڪرافٽ پيپر ٽيوبون هيون (سرپل کليل، 0.8 سينٽي ميٽر ID × 15 سينٽي ميٽر L) (جونز ويل پيپر ٽيوب ڪمپني، مشي گن) جيڪي مبهم سيلوفين ٽيوبن ۾ داخل ڪيون ويون هيون (0.7 OD ڏسو پلاسٽڪ پلگ (T-1X پلگ) نيسٽنگ سائيٽون مهيا ڪن ٿا.
ٻئي نيسٽ باڪس اوڀر طرف مُنهن ڪري رهيا هئا ۽ سائي پلاسٽڪ جي باغ جي باڙ سان ڍڪيل هئا (Everbilt ماڊل #889250EB12، کليل سائيز 5 × 5 سينٽي ميٽر، 0.95 ميٽر × 100 ميٽر) ته جيئن ڪُوڙن ۽ پکين جي رسائي کي روڪي سگهجي ۽ نيسٽ باڪس جي مٽي باڪس جي ڀرسان مٽي جي مٿاڇري تي رکيا ويا. نيسٽ باڪس (ضمني شڪل 1a). مکڻ جي بور ڪندڙ انڊا روزانو آکيرن مان 30 ٽيوب گڏ ڪري ۽ انهن کي ليبارٽري ڏانهن منتقل ڪري گڏ ڪيا ويا. قينچي استعمال ڪندي، ٽيوب جي آخر ۾ هڪ ڪٽ ٺاهيو، پوءِ بروڊ سيلز کي ظاهر ڪرڻ لاءِ سرپل ٽيوب کي الڳ ڪريو. انفرادي انڊا ۽ انهن جي پولن کي هڪ وکر اسپاتولا استعمال ڪندي هٽايو ويو (مائڪرو سلائيڊ ٽول ڪٽ، بايو ڪوئپ پراڊڪٽس انڪارپوريٽڊ، ڪيليفورنيا). انڊا نم فلٽر پيپر تي انڪيوبيٽ ڪيا ويا ۽ اسان جي تجربن ۾ استعمال ٿيڻ کان اڳ 2 ڪلاڪن لاءِ پيٽري ڊش ۾ رکيا ويا (ضمني شڪل 1b-d).
ليبارٽري ۾، اسان سيب جي ڦل کان اڳ ۽ دوران لاڳو ڪيل ڇهن فنگسائيڊس جي زباني زهر جو جائزو ورتو، ٽن ڪنسنٽريشنز (0.1X، 0.5X، ۽ 1X، جتي 1X في 100 گيلن پاڻي/ايڪڙ تي لاڳو ڪيل نشان آهي. فيلڊ ۾ وڌيڪ مقدار = ڪنسنٽريشن).، ٽيبل 1). هر ڪنسنٽريشن کي 16 ڀيرا ورجايو ويو (n = 16). ٻه ڪانٽيڪٽ فنگسائيڊس (ٽيبل S1: مينڪوزيب 2696.14 پي پي ايم ۽ ڪيپٽن 2875.88 پي پي ايم) ۽ چار سسٽماتي فنگسائيڊس (ٽيبل S1: پائريٿيوسٽروبن 250.14 پي پي ايم؛ ٽرائيفلوڪسيسٽروبن 110.06 پي پي ايم؛ مائيڪلوبوٽانيل ايزول 75 .12 پي پي ايم؛ سائپروڊينيل 280.845 پي پي ايم) ميون، ڀاڄين ۽ سينگار فصلن لاءِ زهر. اسان گرائنڊر استعمال ڪندي پولن کي هڪجهڙائي بڻايو، 0.20 گرام هڪ کوهه (24 ويل فالڪن پليٽ) ۾ منتقل ڪيو، ۽ 1 μL فنگسائيڊ محلول شامل ڪيو ۽ ملايو ته جيئن 1 ملي ميٽر گہرے کوهن سان پرامڊل پولن ٺاهيو وڃي جنهن ۾ انڊا رکيا ويا هئا. هڪ مني اسپاتولا استعمال ڪندي جاءِ (ضمني شڪل 1c,d). فالڪن پليٽون ڪمري جي حرارت (25 ° C) ۽ 70٪ نسبتي نمي تي محفوظ ڪيون ويون. اسان انهن جو مقابلو ڪنٽرول لاروا سان ڪيو ويو جنهن کي خالص پاڻي سان علاج ڪيل هڪجهڙائي پولن غذا ڏني وئي. اسان موت جي شرح کي رڪارڊ ڪيو ۽ لاروا جي وزن کي هر ٻئي ڏينهن ماپيو جيستائين لاروا هڪ تجزياتي توازن استعمال ڪندي پريپوپل عمر تائين نه پهچي (فشر سائنسي، درستگي = 0.0001 گرام). آخرڪار، 2.5 مهينن کان پوءِ ڪوڪون کي کولڻ سان جنس جي تناسب جو اندازو لڳايو ويو.
ڊي اين اي سڄي O. cornifrons لاروا مان ڪڍيو ويو (n = 3 في علاج جي حالت، مينڪوزيب سان علاج ٿيل ۽ علاج نه ٿيل پولن) ۽ اسان انهن نمونن تي مائڪروبيل ڊائيوورسٽي تجزيا ڪيا، خاص طور تي ڇاڪاڻ ته مينڪوزيب ۾ لاروا ۾ سڀ کان وڌيڪ موت جو مشاهدو ڪيو ويو. MnZn حاصل ڪندي. ڊي اين اي کي DNAZymoBIOMICS®-96 MagBead DNA ڪٽ (Zymo Research, Irvine, CA) استعمال ڪندي وڌايو ويو، صاف ڪيو ويو، ۽ v3 ڪٽ استعمال ڪندي Illumina® MiSeq™ تي ترتيب ڏني وئي (600 چڪر). بيڪٽيريا 16S رائبوسومل آر اين اي جينز جي ٽارگيٽڊ سيڪوئنسنگ Quick-16S™ NGS لائبريري پريپ ڪٽ (Zymo Research, Irvine, CA) استعمال ڪندي ڪئي وئي پرائمر استعمال ڪندي 16S rRNA جين جي V3-V4 علائقي کي نشانو بڻايو ويو. اضافي طور تي، 18S سيڪوئنسنگ 10٪ PhiX شموليت استعمال ڪندي ڪئي وئي، ۽ ايمپليفڪيشن پرائمر جوڙو 18S001 ۽ NS4 استعمال ڪندي ڪئي وئي.
QIIME2 پائپ لائن (v2022.11.1) استعمال ڪندي جوڙيل پڙهڻ 39 درآمد ڪريو ۽ پروسيس ڪريو. انهن پڙهڻ کي ٽرم ڪيو ويو ۽ ضم ڪيو ويو، ۽ QIIME2 (qiime dada2 noise pairing)40 ۾ DADA2 پلگ ان استعمال ڪندي chimeric sequences کي هٽايو ويو. 16S ۽ 18S ڪلاس اسائنمنٽ آبجيڪٽ ڪلاسيفائر پلگ ان Classify-sklearn ۽ اڳ-تربيت ٿيل آرٽيفيڪٽ silva-138-99-nb-classifier استعمال ڪندي ڪيا ويا.
سڀني تجرباتي ڊيٽا کي نارملٽي (شاپيرو-ولڪس) ۽ ويريئنس جي هڪجهڙائي (ليوين جو ٽيسٽ) لاءِ جانچيو ويو. ڇاڪاڻ ته ڊيٽا سيٽ پيراميٽرڪ تجزيي جي مفروضن کي پورو نه ڪيو ۽ ٽرانسفارميشن باقيات کي معياري بڻائڻ ۾ ناڪام ٿي، اسان لاروا جي تازي وزن تي علاج جي اثر جو جائزو وٺڻ لاءِ ٻن عنصرن [وقت (ٽي-فيز 2، 5، ۽ 8 ڏينهن جي وقت پوائنٽس) ۽ فنگسائيڊ] سان هڪ غير پيراميٽرڪ ٻه طرفي ANOVA (ڪرسڪل-والس) ڪيو، پوءِ ولڪوڪسن ٽيسٽ استعمال ڪندي پوسٽ هاڪ نان پيراميٽرڪ پيئر وائز مقابلو ڪيو ويو. اسان ٽن فنگسائيڊ ڪنسنٽريشن 41،42 ۾ بقا تي فنگسائيڊ جي اثرن جو مقابلو ڪرڻ لاءِ پوئسن ڊسٽريبيوشن سان هڪ عام لڪير ماڊل (GLM) استعمال ڪيو. فرق جي گهڻائي جي تجزيي لاءِ، ايمپليڪن سيڪوئنس مختلف قسمن (ASVs) جو تعداد جينس جي سطح تي ختم ڪيو ويو. 16S (جينس ليول) ۽ 18S نسبتي ڪثرت استعمال ڪندڙ گروپن جي وچ ۾ فرق جي ڪثرت جو مقابلو بيٽا زيرو-انفليٽڊ (BEZI) فيملي ڊسٽريبيوشن سان پوزيشن، اسڪيل ۽ شڪل (GAMLSS) لاءِ هڪ عام اضافو ماڊل استعمال ڪندي ڪيو ويو، جيڪو مائڪرو بايوم R43 (v1.1) ۾ ميڪرو تي ماڊل ڪيو ويو هو. 1). فرق جي تجزيي کان اڳ مائيٽوڪونڊريل ۽ ڪلوروپلاسٽ نسلن کي هٽايو. 18S جي مختلف ٽيڪسونومڪ سطحن جي ڪري، هر ٽيڪسون جي صرف گھٽ ۾ گھٽ سطح فرق جي تجزيي لاءِ استعمال ڪئي وئي. سڀئي شمارياتي تجزيا R (v. 3.4.3.، CRAN پروجيڪٽ) (ٽيم 2013) استعمال ڪندي ڪيا ويا.
مينڪوزيب، پائريٿيوسٽروبن، ۽ ٽرائيفلوڪسيسٽروبن جي نمائش سان او. ڪارنيفرون ۾ جسم جي وزن ۾ خاص طور تي گهٽتائي آئي (شڪل 1). انهن اثرات کي مسلسل طور تي تشخيص ڪيل ٽنهي دوائن لاءِ ڏٺو ويو (شڪل 1a-c). سائڪلوسٽروبن ۽ مائيڪلوبوٽانيل لاروا جي وزن ۾ خاص طور تي گهٽتائي نه ڪئي.
اسٽيم بورر لاروا جو سراسري تازو وزن چار غذائي علاج (هموجنسي پولن فيڊ + فنگسائيڊ: ڪنٽرول، 0.1X، 0.5X ۽ 1X ڊوز) جي تحت ٽن وقتي پوائنٽن تي ماپيو ويو. (a) گھٽ دوز (0.1X): پھريون وقت پوائنٽ (ڏينهن 1): χ2: 30.99، DF = 6؛ P < 0.0001، ٻيو وقت پوائنٽ (ڏينهن 5): 22.83، DF = 0.0009؛ ٽيون وقت؛ نقطو (ڏينهن 8): χ2: 28.39، DF = 6؛ (b) اڌ دوز (0.5X): پھريون وقت پوائنٽ (ڏينهن 1): χ2: 35.67، DF = 6؛ P < 0.0001، ٻيو وقت پوائنٽ (پهريون ڏينهن). ): χ2: 15.98، DF = 6؛ P = 0.0090؛ ٽيون ٽائيم پوائنٽ (ڏينهن 8) χ2: 16.47، DF = 6؛ (c) سائيٽ يا مڪمل دوز (1X): پهريون ٽائيم پوائنٽ (ڏينهن 1) χ2: 20.64، P = 6؛ P = 0.0326، ٻيو ٽائيم پوائنٽ (ڏينهن 5): χ2: 22.83، DF = 6؛ P = 0.0009؛ ٽيون ٽائيم پوائنٽ (ڏينهن 8): χ2: 28.39، DF = 6؛ ويرينس جو غير پيراميٽرڪ تجزيو. بار جوڙي جي مقابلي جي اوسط ± SE جي نمائندگي ڪن ٿا (α = 0.05) (n = 16) *P ≤ 0.05، **P ≤ 0.001، ***P ≤ 0.0001.
گھٽ ۾ گھٽ دوز (0.1X) تي، ٽرائيفلوڪسيسٽروبن سان لاروا جي جسم جو وزن 60٪، مينڪوزيب سان 49٪، مائيڪلوبوٽانيل سان 48٪، ۽ پيريٿسٽروبن سان 46٪ گھٽجي ويو (شڪل 1a). جڏهن فيلڊ ڊوز (0.5X) جي اڌ جي سامهون آيو، ته مينڪوزيب لاروا جي جسماني وزن ۾ 86٪، پيريٿسٽروبن 52٪ ۽ ٽرائيفلوڪسيسٽروبن 50٪ گھٽجي ويو (شڪل 1b). مينڪوزيب جي مڪمل فيلڊ ڊوز (1X) لاروا جي وزن ۾ 82٪، پيريٿسٽروبن 70٪، ۽ ٽرائيفلوڪسيسٽروبن، مائيڪلوبوٽانيل ۽ سنگارڊ کي تقريبن 30٪ گھٽائي ڇڏيو (شڪل 1c).
لاروا کي مينڪوزيب سان علاج ڪيل پولن کارائڻ ۾ موت جي شرح سڀ کان وڌيڪ هئي، ان کان پوءِ پائريٿيوسٽروبن ۽ ٽرائيفلوڪسيسٽروبن هئا. مينڪوزيب ۽ پائريٽسولين جي وڌندڙ مقدار سان موت جي شرح وڌي وئي (شڪل 2؛ ٽيبل 2). جڏهن ته، ٽرائيفلوڪسيسٽروبن جي ڪنسنٽريشن ۾ واڌ سان مکڻ جي بور ڪندڙ جي موت جي شرح صرف ٿوري وڌي وئي؛ سائپروڊينيل ۽ ڪيپٽن ڪنٽرول علاج جي مقابلي ۾ موت جي شرح ۾ خاص طور تي اضافو نه ڪيو.
ڇهن مختلف فنگسائيڊس سان انفرادي طور تي علاج ڪيل پولن جي استعمال کان پوءِ بورر فلائي لاروا جي موت جي شرح جو مقابلو ڪيو ويو. مينڪوزيب ۽ پينٽوپائرامائيڊ مڪئي جي ميگوٽس جي زباني نمائش لاءِ وڌيڪ حساس هئا (GLM: χ = 29.45، DF = 20، P = 0.0059) (لائن، سلپ = 0.29، P < 0.001؛ سلپ = 0.24، P < 0.00)).
سراسري طور تي، سڀني علاجن ۾، 39.05٪ مريض عورتون ۽ 60.95٪ مرد هئا. ڪنٽرول علاج ۾، عورتن جو تناسب گهٽ دوز (0.1X) ۽ اڌ دوز (0.5X) مطالعي ۾ 40٪ هو، ۽ فيلڊ ڊوز (1X) مطالعي ۾ 30٪ هو. 0.1X دوز تي، مينڪوزيب ۽ مائيڪلوبوٽانيل سان علاج ڪيل پولن فيڊ لاروا ۾، 33.33٪ بالغ عورتون هيون، 22٪ بالغ عورتون هيون، 44٪ بالغ لاروا ماده هيون، 44٪ بالغ لاروا ماده هيون. ماده، 41٪ بالغ لاروا ماده هيون، ۽ ڪنٽرول 31٪ هئا (شڪل 3a). 0.5 ڀيرا وڌيڪ دوز تي، مينڪوزيب ۽ پائريٿيوسٽروبن گروپ ۾ 33 سيڪڙو بالغ ڪيڙا عورتون هيون، 36 سيڪڙو ٽرائيفلوڪسيسٽروبن گروپ ۾، 41 سيڪڙو مائيڪلوبوٽانيل گروپ ۾، ۽ 46 سيڪڙو سائپروسٽروبن گروپ ۾. هي انگ گروپ ۾ 53 سيڪڙو هو. ڪيپٽن گروپ ۾ ۽ 38 سيڪڙو ڪنٽرول گروپ ۾ (شڪل 3b). 1X دوز تي، مينڪوزيب گروپ ۾ 30 سيڪڙو عورتون هيون، پائريٿيوسٽروبن گروپ ۾ 36 سيڪڙو، ٽرائيفلوڪسيسٽروبن گروپ ۾ 44 سيڪڙو، مائيڪلوبوٽانيل گروپ ۾ 38 سيڪڙو، ڪنٽرول گروپ ۾ 50 سيڪڙو عورتون هيون - 38.5 سيڪڙو (شڪل 3c).
لاروا اسٽيج فنگسائيڊ جي نمائش کان پوءِ مادي ۽ نر بوررز جو سيڪڙو. (الف) گهٽ دوز (0.1X). ​​(ب) اڌ دوز (0.5X). (ج) فيلڊ دوز يا مڪمل دوز (1X).
16S تسلسل جي تجزيي مان ظاهر ٿيو ته بيڪٽيريا گروپ مينڪوزيب سان علاج ٿيل پولن سان کارايل لاروا ۽ غير علاج ٿيل پولن سان کارايل لاروا جي وچ ۾ فرق هو (شڪل 4a). پولن تي کارايل علاج ٿيل لاروا جو مائڪروبيل انڊيڪس مينڪوزيب سان علاج ٿيل پولن تي کارايل لاروا جي ڀيٽ ۾ وڌيڪ هو (شڪل 4b). جيتوڻيڪ گروپن جي وچ ۾ اميري ۾ مشاهدو ڪيل فرق شمارياتي طور تي اهم نه هو، پر اهو غير علاج ٿيل پولن تي کارايل لاروا جي مشاهدو ڪيل کان گهٽ هو (شڪل 4c). نسبتي ڪثرت ڏيکاري ٿي ته ڪنٽرول پولن تي کارايل لاروا جو مائڪروبيوٽا مينڪوزيب سان علاج ٿيل لاروا تي کارايل لاروا جي ڀيٽ ۾ وڌيڪ متنوع هو (شڪل 5a). وضاحتي تجزيي ڪنٽرول ۽ مينڪوزيب سان علاج ٿيل نمونن ۾ 28 نسلن جي موجودگي کي ظاهر ڪيو (شڪل 5b). c 18S تسلسل استعمال ڪندي تجزيو ڪو به اهم فرق ظاهر نه ڪيو (ضمني شڪل 2).
16S تسلسل تي ٻڌل SAV پروفائلز جو مقابلو شينن جي دولت سان ڪيو ويو ۽ فائلم سطح تي مشاهدو ڪيل دولت سان ڪيو ويو. (a) پرنسپل ڪوآرڊينيٽ تجزيو (PCoA) مجموعي مائڪروبيل ڪميونٽي structure تي ٻڌل آهي جيڪو علاج نه ٿيل پولن-فيڊ يا ڪنٽرول (نيرو) ۽ مينڪوزيب-فيڊ لاروا (نارنگي) ۾. هر ڊيٽا پوائنٽ هڪ الڳ نموني جي نمائندگي ڪري ٿو. PCoA کي ملٽي ويريٽ ٽي ورڇ جي بري-ڪرٽس فاصلي کي استعمال ڪندي حساب ڪيو ويو. اوول 80٪ اعتماد جي سطح جي نمائندگي ڪن ٿا. (b) باڪس پلاٽ، خام شينن دولت ڊيٽا (پوائنٽس) ۽ سي. مشاهدو ڪيل دولت. باڪس پلاٽ وچين لائن، انٽرڪوارٽائل رينج (IQR)، ۽ 1.5 × IQR (n = 3) لاءِ باڪس ڏيکارين ٿا.
مينڪوزيب سان علاج ٿيل ۽ علاج نه ٿيل پولن تي کارايل لاروا جي مائڪروبيل برادرين جي جوڙجڪ. (الف) لاروا ۾ مائڪروبيل نسل جي نسبتي گهڻائي. (ب) سڃاڻپ ٿيل مائڪروبيل برادرين جو گرمي نقشو. ڊيلفٽيا (مشڪل تناسب (OR) = 0.67، P = 0.0030) ۽ سوڊوموناس (OR = 0.3، P = 0.0074)، مائڪروبيٽيريم (OR = 0.75، P = 0.0617) (OR = 1.5، P = 0.0060)؛ گرمي نقشي جون قطارون رابطي جي فاصلي ۽ سراسري رابطي کي استعمال ڪندي ڪلستر ڪيون ويون آهن.
اسان جا نتيجا ڏيکارين ٿا ته گلن جي دوران وڏي پيماني تي استعمال ٿيندڙ رابطي (مينڪوزيب) ۽ سسٽماتي (پائروسٽروبن ۽ ٽرائيفلوڪسيسٽروبن) فنگسائيڊز جي زباني نمائش، خاص طور تي وزن ۾ واڌ کي گهٽايو ۽ مڪئي جي لاروا جي موت کي وڌايو. ان کان علاوه، مينڪوزيب پريپوپل اسٽيج دوران مائڪرو بائيوم جي تنوع ۽ اميري کي خاص طور تي گهٽايو. مائيڪلوبوٽانيل، هڪ ٻيو سسٽماتي فنگسائيڊ، ٽنهي دوائن تي لاروا جي جسم جي وزن ۾ واڌ کي خاص طور تي گهٽايو. اهو اثر ٻئي (ڏينهن 5) ۽ ٽئين (ڏينهن 8) وقت جي پوائنٽن تي واضح هو. ان جي ابتڙ، سائپروڊينيل ۽ ڪيپٽن ڪنٽرول گروپ جي مقابلي ۾ وزن ۾ واڌ يا بقا کي خاص طور تي گهٽ نه ڪيو. اسان جي ڄاڻ موجب، هي ڪم پهريون آهي جيڪو مکئي جي فصلن جي سڌي پولن جي نمائش ذريعي بچائڻ لاءِ استعمال ٿيندڙ مختلف فنگسائيڊز جي فيلڊ ريٽ جي اثرات کي طئي ڪري ٿو.
ڪنٽرول علاج جي مقابلي ۾ سڀني فنگسائيڊ علاجن جسم جي وزن ۾ واڌ کي گهٽائي ڇڏيو. مينڪوزيب جو لاروا جي جسم جي وزن ۾ واڌ تي سڀ کان وڏو اثر پيو، جنهن ۾ سراسري طور تي 51٪ گهٽتائي آئي، ان کان پوءِ پائريٿيوسٽروبن. تاهم، ٻين مطالعي ۾ لاروا جي مرحلن تي فنگسائيڊ جي فيلڊ ڊوز جي خراب اثرن جي رپورٽ نه ڪئي وئي آهي 44. جيتوڻيڪ ڊيٿيو ڪارباميٽ بايو سائڊس کي گهٽ تيز زهريت ڏيکاري وئي آهي 45، ايٿيلين بسڊيٿيو ڪارباميٽ (EBDCS) جهڙوڪ مينڪوزيب يوريا ايٿيلين سلفائيڊ ۾ خراب ٿي سگهي ٿو. ٻين جانورن ۾ ان جي ميوٽاجينڪ اثرات کي ڏنو ويو، هي تباهي پيداوار مشاهدو ٿيل اثرات لاءِ ذميوار ٿي سگهي ٿي 46,47. پوئين مطالعي مان ظاهر ٿيو آهي ته ايٿيلين ٿيوريا جي ٺهڻ تي عنصرن جهڙوڪ بلند درجه حرارت 48، نمي جي سطح 49 ۽ پيداوار جي اسٽوريج جي ڊيگهه 50 کان اثر پوي ٿو. بايو سائڊس لاءِ مناسب اسٽوريج حالتون انهن ضمني اثرات کي گهٽائي سگهن ٿيون. ان کان علاوه، يورپي فوڊ سيفٽي اٿارٽي پائريٿيوپائيڊ جي زهريت بابت خدشو ظاهر ڪيو آهي، جيڪو ٻين جانورن جي هاضمي سسٽم لاءِ ڪارڪينوجنڪ ڏيکاريو ويو آهي 51.
مينڪوزيب، پائريٿيوسٽروبن، ۽ ٽرائيفلوڪسيسٽروبن جي زباني استعمال سان مکڻ جي سور ڪندڙ لاروا جي موت جي شرح وڌي ٿي. ان جي ابتڙ، مائيڪلوبوٽانيل، سيپروسائيڪلين ۽ ڪيپٽن جو موت جي شرح تي ڪو به اثر نه پيو. اهي نتيجا لاڊرنر ۽ ٻين کان مختلف آهن. 52، جن ڏيکاريو ته ڪيپٽن بالغ O. lignaria ۽ Apis mellifera L. (Hymenoptera، Apisidae) جي بقا کي خاص طور تي گهٽائي ڇڏيو. ان کان علاوه، ڪيپٽن ۽ بوسڪالڊ جهڙا فنگسائيڊ لاروا جي موت جو سبب بڻجن ٿا 52,53,54 يا کاڌ خوراڪ جي رويي کي تبديل ڪن ٿا 55. اهي تبديليون، موڙ ۾، پولن جي غذائي معيار ۽ آخرڪار لاروا جي مرحلي جي توانائي جي حاصلات کي متاثر ڪري سگهن ٿيون. ڪنٽرول گروپ ۾ ڏٺو ويو موت جي شرح ٻين مطالعي 56,57 سان مطابقت رکي ٿي.
اسان جي ڪم ۾ ڏٺو ويو نر جي پسند جو جنس تناسب شايد گلن جي دوران ناکافي ميلاپ ۽ خراب موسمي حالتن جهڙن عنصرن جي ذريعي بيان ڪيو وڃي، جيئن اڳ ۾ وائيسينز ۽ بوش پاران او. ڪارنوٽا لاءِ تجويز ڪيو ويو هو. جيتوڻيڪ اسان جي مطالعي ۾ مادي ۽ نر کي ميلاپ لاءِ چار ڏينهن هئا (هڪ عرصو عام طور تي ڪامياب ميلاپ لاءِ ڪافي سمجهيو ويندو آهي)، اسان جان بوجھ ڪري روشني جي شدت کي گهٽايو ته جيئن دٻاءُ گهٽجي وڃي. تاهم، هي ترميم غير ارادي طور تي ميلاپ جي عمل ۾ مداخلت ڪري سگهي ٿي 61. ان کان علاوه، مکيون ڪيترن ئي ڏينهن جي خراب موسم جو تجربو ڪن ٿيون، جن ۾ مينهن ۽ گهٽ درجه حرارت (<5°C) شامل آهن، جيڪو ميلاپ جي ڪاميابي تي منفي اثر پڻ وجهي سگهي ٿو 4,23.
جيتوڻيڪ اسان جو مطالعو پوري لاروا مائڪروبائيوم تي ڌيان ڏنو، اسان جا نتيجا بيڪٽيريا برادرين جي وچ ۾ امڪاني لاڳاپن ۾ بصيرت فراهم ڪن ٿا جيڪي مکين جي غذائيت ۽ فنگسائيڊ جي نمائش لاءِ اهم ٿي سگهن ٿا. مثال طور، لاروا کي مينڪوزيب سان علاج ڪيل پولن کارايو ويو، لاروا کي غير علاج ٿيل پولن کارائڻ جي مقابلي ۾ مائڪروبيل برادري جي جوڙجڪ ۽ گهڻائي کي گهٽائي ڇڏيو. لاروا ۾ علاج نه ٿيل پولن کارائڻ، بيڪٽيريا گروپ پروٽو بيڪٽيريا ۽ ايڪٽينوبيڪٽيريا غالب هئا ۽ بنيادي طور تي ايروبڪ يا فيڪٽريٽو ايروبڪ هئا. ڊيلفٽ بيڪٽيريا، عام طور تي اڪيلو مکين جي نسلن سان لاڳاپيل، اينٽي بايوٽڪ سرگرمي جي طور تي سڃاتل آهن، جيڪي پيٿوجنز جي خلاف هڪ امڪاني حفاظتي ڪردار جي نشاندهي ڪن ٿا. هڪ ٻي بيڪٽيريا نسل، سوڊوموناس، لاروا کي غير علاج ٿيل پولن کارائڻ ۾ گهڻي هئي، پر مينڪوزيب سان علاج ڪيل لاروا ۾ خاص طور تي گهٽجي وئي. اسان جا نتيجا پوئين مطالعي جي حمايت ڪن ٿا جيڪي سوڊوموناس کي O. bicornis35 ۽ ٻين سولو واسپس34 ۾ سڀ کان وڌيڪ گهڻائي واري نسل مان هڪ جي طور تي سڃاڻن ٿا. جيتوڻيڪ O. cornifrons جي صحت ۾ Pseudomonas جي ڪردار لاءِ تجرباتي ثبوتن جو مطالعو نه ڪيو ويو آهي، پر هي بيڪٽيريا بيٽل Paederus fuscipes ۾ حفاظتي زهر جي ترکیب کي فروغ ڏيڻ ۽ ويٽرو 35، 65 ۾ ارجنائن ميٽابولزم کي فروغ ڏيڻ لاءِ ڏيکاريو ويو آهي. اهي مشاهدا O. cornifrons لاروا جي ترقي جي وقت دوران وائرل ۽ بيڪٽيريا جي دفاع ۾ هڪ امڪاني ڪردار جي تجويز ڪن ٿا. مائڪرو بيڪٽيريم هڪ ٻيو جينس آهي جيڪو اسان جي مطالعي ۾ سڃاڻپ ڪيو ويو آهي جيڪو ڪارو سپاهي فلائي لاروا ۾ بک جي حالتن ۾ وڏي تعداد ۾ موجود هجڻ جي رپورٽ ڪئي وئي آهي 66. O. cornifrons لاروا ۾، مائڪرو بيڪٽيريا دٻاءُ جي حالتن ۾ گٽ مائڪروبيوم جي توازن ۽ لچڪ ۾ حصو وٺي سگهي ٿو. اضافي طور تي، روڊوڪوڪس O. cornifrons لاروا ۾ ملي ٿو ۽ ان جي detoxification صلاحيتن لاءِ مشهور آهي 67. هي جينس A. florea جي گٽ ۾ پڻ ملي ٿو، پر تمام گهٽ مقدار ۾ 68. اسان جا نتيجا ڪيترن ئي مائڪروبيل ٽيڪسا ۾ ڪيترن ئي جينياتي تبديلين جي موجودگي کي ظاهر ڪن ٿا جيڪي لاروا ۾ ميٽابولڪ عملن کي تبديل ڪري سگهن ٿا. جڏهن ته، او. ڪارنيفرون جي فنڪشنل تنوع جي بهتر سمجھ جي ضرورت آهي.
خلاصي ۾، نتيجا ظاهر ڪن ٿا ته مينڪوزيب، پائريٿيوسٽروبن، ۽ ٽرائيفلوڪسيسٽروبن جسم جي وزن ۾ واڌ کي گهٽايو ۽ مکڻ جي بور ڪندڙ لاروا جي موت کي وڌايو. جيتوڻيڪ پولينٽر تي فنگسائيڊس جي اثرن بابت وڌندڙ خدشو آهي، انهن مرکبات جي باقي ميٽابولائٽس جي اثرن کي بهتر سمجهڻ جي ضرورت آهي. انهن نتيجن کي مربوط پولينٽر مئنيجمينٽ پروگرامن لاءِ سفارشن ۾ شامل ڪري سگهجي ٿو جيڪي هارين کي ميوي جي وڻن جي گلن کان اڳ ۽ دوران ڪجهه فنگسائيڊس جي استعمال کان بچڻ ۾ مدد ڪن ٿا فنگسائيڊس کي چونڊڻ ۽ استعمال جي وقت کي مختلف ڪرڻ سان، يا گهٽ نقصانڪار متبادل جي استعمال جي حوصلا افزائي ڪندي 36. هي معلومات سفارشون تيار ڪرڻ لاءِ اهم آهي. جراثيم ڪش جي استعمال تي، جهڙوڪ موجوده اسپري پروگرامن کي ترتيب ڏيڻ ۽ فنگسائيڊس جي چونڊ ڪرڻ وقت اسپري جي وقت کي تبديل ڪرڻ يا گهٽ خطرناڪ متبادل جي استعمال کي فروغ ڏيڻ. جنس جي تناسب، کاڌ خوراڪ جي رويي، گٽ مائڪروبيوم، ۽ مکڻ جي بور ڪندڙ وزن جي گھٽتائي ۽ موت جي بنياد تي ماليڪيولر ميڪانيزم تي فنگسائيڊس جي خراب اثرات بابت وڌيڪ تحقيق جي ضرورت آهي.
شڪل 1 ۽ 2 ۾ ماخذ ڊيٽا 1، 2 ۽ 3 کي فگ شيئر ڊيٽا ريپوزٽري DOI ۾ جمع ڪيو ويو آهي: https://doi.org/10.6084/m9.figshare.24996245 ۽ https://doi.org/10.6084/m9. figshare.24996233. موجوده مطالعي ۾ تجزيو ڪيل ترتيبون (شڪلون 4، 5) NCBI SRA ريپوزٽري ۾ رسائي نمبر PRJNA1023565 تحت موجود آهن.
بوش، جي. ۽ ڪيمپ، ڊبليو پي زرعي فصلن جي پولينٽر طور ماکي جي مکين جي نسلن جي ترقي ۽ قيام: جينس اوسميا جو مثال. (هائيمينوپٽيرا: ميگاچليڊي) ۽ ميوي جا وڻ. بيل. نٽومور. وسيلو. 92، 3-16 (2002).
پارڪر، ايم جي ۽ ٻيا. نيو يارڪ ۽ پنسلوانيا ۾ سيب جي پوکيندڙن ۾ متبادل پولينٽر جي پولينيشن جا طريقا ۽ تصور. تازه ڪاري. زراعت. کاڌي جا نظام. 35، 1-14 (2020).
ڪوچ آءِ.، لونسڊورف اي ڊبليو، آرٽز ڊي آر، پٽس-سنگر ٽي ايل ۽ ريڪٽس ٽي ايڇ مقامي مکين جي استعمال سان بادام جي پولينيشن جي ماحوليات ۽ معاشيات. جي. اقتصاديات. اينٽومور. 111، 16-25 (2018).
لي، اي.، هي، وائي.، ۽ پارڪ، وائي.- ايل. ٽراگوپان فينولوجي تي موسمياتي تبديلي جا اثر: آبادي جي انتظام لاءِ اثر. چڙهڻ. تبديلي 150، 305–317 (2018).
آرٽز، ڊي آر ۽ پٽس-سنگر، ​​ٽي ايل ٻن منظم اڪيلي مکين (اوسميا ليگنيريا ۽ ميگاچائل روٽونڊاٽا) جي آکيري جي رويي تي فنگسائيڊ ۽ ايڊجوونٽ اسپري جو اثر. پلا ايس ون 10، e0135688 (2015).
بيوويس، ايس. وغيره. هڪ گهٽ زهريلي فصل فنگسائيڊ (فينبوڪونازول) نر پيدائشي معيار جي سگنلن ۾ مداخلت ڪري ٿو جنهن جي نتيجي ۾ جهنگلي اڪيلي مکين ۾ ملن جي ڪاميابي گهٽجي ٿي. جي. ايپس. ماحوليات. 59، 1596-1607 (2022).
اسگولاسٽرا ايف. وغيره. نيونيڪوٽينائيڊ جيت مار دوائون ۽ ارگوسٽرول بايو سنٿيسس ٽن مکين جي نسلن ۾ هم آهنگي واري فنگسائيڊ جي موت کي دٻائي ٿو. ڪيڙن جو ڪنٽرول. سائنس. 73، 1236–1243 (2017).
ڪُهنيمن جي جي، گِلنگ جي، وان ڊائڪ ايم ٽي، فورڊائس آر ايف. ۽ ڊينفورٿ بي اين سوليٽري واسپ لاروا پولن پاران اسٽيم-نيسٽنگ مکين اوسميا ڪارنيفرون (ميگاچيليڊي) کي فراهم ڪيل بيڪٽيريا جي تنوع کي تبديل ڪن ٿا. فرنٽ. مائڪرو آرگنزم. 13، 1057626 (2023).
ڌرمپال پي ايس، ڊينفورٿ بي اين ۽ اسٽيفن ايس اي خمير ٿيل پولن ۾ ايڪٽوسيمبيوٽڪ مائڪروجنزم اڪيلائي مکين جي ترقي لاءِ اوترا ئي اهم آهن جيترا پولن پاڻ. ماحوليات. ارتقا. 12. e8788 (2022).
ڪيلڊرر ايم، مينيسي ايل ايم، ڪيپوٽو ايف ۽ ٿالهيمر ايم. سيب جي باغن ۾ قطارن ۾ پوکڻ جي بيمارين کي ڪنٽرول ڪرڻ لاءِ: مائڪروبيل اشارن تي ٻڌل هڪ عملي اثرائتي مطالعي. ٻوٽي جي مٽي 357، 381-393 (2012).
مارٽن پي ايل، ڪراوچڪ ٽي.، خدادادي ايف.، اچيمووچ ايس جي ۽ پيٽر ڪي اي وچ ايٽلانٽڪ آمريڪا ۾ سيب جو ڪڙڪو سڙڻ: سبب بڻجندڙ نسلن جو جائزو ۽ علائقائي موسمي حالتن ۽ ڪلٽيور جي حساسيت جو اثر. فائٽوپيٿولوجي 111، 966-981 (2021).
ڪولن ايم جي، ٿامپسن ايل جي، ڪيرولن جي ڪي، اسٽوٽ جي ڪي. ۽ اسٽينلي ڊي اي فنگسائيڊس، جڙي ٻوٽين ۽ مکيون: موجوده تحقيق ۽ طريقن جو هڪ منظم جائزو. پي ايل او ايس ون 14، اي 0225743 (2019).
پِلنگ، اي ڊي ۽ جپسن، پي سي، ماکي جي مکين تي اي بي آءِ فنگسائيڊس ۽ پائريٿرائڊ جيت مار دوائن جا هم آهنگي وارا اثر (ايپس ميليفيرا). سائنس کي ڪيڙا. 39، 293-297 (1993).
مسين، اي سي، لوپيز، جي اي ۽ پينگ، سي وائي ماکي جي لاروا ايپس ميليفيرا ايل (هائيمينوپٽيرا: ايپيڊي) جي واڌ ۽ ترقي تي چونڊيل فنگسائيڊس جو اثر. اربع. نيٽومور. 33، 1151-1154 (2004).
وان ڊائڪ، ايم.، مولن، اي.، وڪ اسٽيڊ، ڊي.، ۽ ميڪ آرٽ، ايس. وڻن جي باغن ۾ پولينٽر جي حفاظت لاءِ جيت مار دوائن جي استعمال لاءِ فيصلي جي رهنمائي (ڪارنيل يونيورسٽي، 2018).
ايواساڪي، جي ايم ۽ هوگينڊورن، ڪي. مکين جو غير جراثيم ڪش دوائن سان رابطو: طريقن ۽ رپورٽ ڪيل نتيجن جو جائزو. زراعت. ماحولياتي نظام. اربع. 314، 107423 (2021).
ڪوپٽ اي ايم، ڪلنگر اي، ڪاڪس-فوسٽر ڊي ايل، راميريز آر اي. ۽ پٽس-سنگر ٽي ايل اوسميا ليگنيريا (هائيمينوپٽيرا: ميگاچليڊي) جي لاروا جي ترقي تي سپلائي جي قسم ۽ جراثيم ڪش جي نمائش جو اثر. اربع. نيٽومور. 51، 240-251 (2022).
ڪوپٽ اي ايم ۽ پٽس-سنگر ٽي ايل، اڪيلائي ۾ خالي آکيري وارين مکين کي جراثيم ڪش جي نمائش جا رستا. اربع. نيٽومور. 47، 499-510 (2018).
پين، اين ٽي وغيره. بالغ جاپاني باغ جي مکين (اوسميا ڪارنيفرون) ۾ جراثيم ڪش جي زهر جي تشخيص لاءِ هڪ نئون انجشن بايو ايسي پروٽوڪول. سائنس. رپورٽون 10، 9517 (2020).