فنگسائيڊ سپليمينٽيشن خالص توانائي جي حاصلات کي گھٽائي ٿي ۽ اڪيلو ميسن جي مکين ۾ مائڪروبيوم تنوع.

Nature.com گهمڻ لاءِ توهان جي مهرباني.توھان استعمال ڪري رھيا آھيو برائوزر جو نسخو محدود CSS سپورٽ آھي.بهترين نتيجن لاءِ، اسان صلاح ڏيون ٿا ته توهان پنهنجي برائوزر جو نئون ورزن استعمال ڪريو (يا انٽرنيٽ ايڪسپلورر ۾ مطابقت واري موڊ کي بند ڪريو).ساڳئي وقت ۾، جاري سهڪار کي يقيني بڻائڻ لاءِ، اسان سائيٽ کي بغير اسٽائل يا جاوا اسڪرپٽ جي ڏيکاري رهيا آهيون.
ڦڦڙن جو استعمال اڪثر ڪري وڻ جي ميوي جي گلن جي دوران ڪيو ويندو آهي ۽ حشرن جي پولينٽر کي خطرو ڪري سگهي ٿو.تنهن هوندي به، ٿورڙي ڄاڻ آهي ته ڪيئن غير ماکيءَ جي پولينٽر (مثال طور، سولٽيري بيز، اوسميا ڪارنيفرون) رابطي کي جواب ڏين ٿا ۽ سسٽماتي فنگسائڊس عام طور تي گلن جي دوران سيب تي استعمال ٿيندا آهن.هي علم خال ريگيوليٽري فيصلن کي محدود ڪري ٿو جيڪي محفوظ ڪنسنٽريشن ۽ فنگسائيڊ اسپري ڪرڻ جي وقت جو تعين ڪن ٿا.اسان ٻن رابطي واري فنگسائڊس (ڪيپٽن ۽ مينڪوزيب) ۽ چار انٽرليئر/فائيٽوسسٽم فنگسائڊس (سيپرو سائڪلين، مائيڪلوبوٽانيل، پائروسٽروبن ۽ ٽرائي فلوڪسسٽروبين) جي اثرن جو جائزو ورتو.لاروا وزن وڌائڻ، بقا، جنسي تناسب ۽ بيڪٽيريا تنوع تي اثر.تشخيص هڪ دائمي زباني بايواسي استعمال ڪندي ڪيو ويو جنهن ۾ پولن کي ٽن دوزن ۾ علاج ڪيو ويو، فيلڊ استعمال (1X)، اڌ دوز (0.5X) ۽ گهٽ دوز (0.1X) لاء موجوده تجويز ڪيل دوز جي بنياد تي.Mancozeb ۽ pyritisoline جي سڀني دوزن خاص طور تي جسم جي وزن ۽ لاروا جي بقا کي گھٽائي ڇڏيو.ان کان پوءِ اسان 16S جين کي ترتيب ڏنو ته جيئن مانڪوزيب جي لاروا بيڪٽيريام کي نمايان ڪري سگهجي، جيڪا سڀ کان وڌيڪ موت جو ذميوار فنگسائيڊ آهي.اسان ڏٺا ته بيڪٽيريا جي تنوع ۽ گھڻائي ۾ خاص طور تي گھٽجي وئي لاروا ۾ مينڪوزيب جي علاج ٿيل پولن تي.اسان جي ليبارٽري جا نتيجا ظاهر ڪن ٿا ته گلن جي دوران انهن مان ڪجهه فنگسائيڊ اسپري ڪرڻ خاص طور تي O. Cornifrons جي صحت لاءِ نقصانڪار آهي.اها معلومات مستقبل جي انتظامي فيصلن لاءِ لاڳاپيل آهي ميوي جي وڻ جي حفاظت جي شين جي پائيدار استعمال جي حوالي سان ۽ ڪم ڪري ٿي ريگيوليٽري عملن جي بنياد جي طور تي جنهن جو مقصد پولينٽر کي تحفظ ڏيڻ آهي.
اڪيلي ميسن ماکيءَ آسميا ڪورنيفرون (Hymenoptera: Megachilidae) 1970ع واري ڏهاڪي جي آخر ۽ 1980ع جي شروعات ۾ جپان کان آمريڪا ۾ متعارف ڪرايو ويو، ۽ ان نسلن ان وقت کان وٺي منظم ماحوليات ۾ اهم پولينٽر ڪردار ادا ڪيو آهي.هن ماکيءَ جي قدرتي آبادي لڳ ڀڳ 50 قسمن جي جهنگلي مکين جو حصو آهي، جيڪي ماکيءَ کي پورو ڪن ٿيون، جيڪي آمريڪا ۾ بادام ۽ سيب جي باغن کي پولينيٽ ڪن ٿيون 2,3.ميسن جي مکين کي ڪيترن ئي چئلينجن کي منهن ڏيڻو پوي ٿو، جن ۾ رهائش جو ٽڪراءُ، پيٿوجنز، ۽ جراثيم 3,4 شامل آهن.حشرات جي دوائن جي وچ ۾، فنگسائڊس توانائي جي حاصلات کي گھٽائي ٿو، 5 ۽ جسم جي ڪنڊيشن 6,7.جيتوڻيڪ تازي تحقيق مان معلوم ٿئي ٿو ته ميسن جي مکين جي صحت سڌي طرح ڪمنسل ۽ ايڪٽوبيڪٽڪ مائڪروجنزمن تي اثر انداز ٿئي ٿي، 8,9 ڇاڪاڻ ته بيڪٽيريا ۽ فنگس غذائيت ۽ مدافعتي ردعمل تي اثرانداز ٿي سگهن ٿا، ميسن مکين جي مائڪروبيئل تنوع تي فنگسائيڊ جي نمائش جا اثر صرف شروع ٿي رهيا آهن. اڀياس ڪيو.
مختلف اثرن جي فنگسائيڊس (رابطي ۽ سسٽماتي) کي باغن ۾ اسپري ڪيو وڃي ٿو گلن کان اڳ ۽ ان دوران بيمارين جي علاج لاءِ جيئن ايپل اسڪيب، بيٽر روٽ، براون روٽ ۽ پائوڊري ڦڦڙ 10,11.ڦڦڙن کي ڦڦڙن لاءِ بي ضرر سمجهيو وڃي ٿو، تنهن ڪري اهي گلن جي دور ۾ باغبانن کي سفارش ڪن ٿا؛مکين پاران انهن فنگسائڊس جي نمائش ۽ انجڻ نسبتاً چڱيءَ طرح ڄاڻايل آهي، ڇاڪاڻ ته اها يو ايس جي ماحولياتي تحفظ واري ايجنسي ۽ ٻين ڪيترن ئي قومي ريگيوليٽري ايجنسين 12,13,14 پاران جراثيمن جي رجسٽريشن جي عمل جو حصو آهي.بهرحال، غير مکين تي فنگسائيڊس جا اثر گهٽ ڄاڻايل آهن ڇو ته اهي آمريڪا ۾ مارڪيٽنگ اختيار ڪرڻ واري معاهدي تحت گهربل نه آهن15.ان کان علاوه، عام طور تي ڪو به معياري پروٽوڪول نه آهي پروٽوڪول هڪ واحد مکڻ جي جاچ لاءِ 16,17، ۽ انهن ڪالونين کي برقرار رکڻ جيڪي ماکيءَ کي جانچ لاءِ مهيا ڪن ٿا 18 مشڪل آهي.جهنگلي مکين تي جراثيمن جي اثرن جو مطالعو ڪرڻ لاءِ يورپ ۽ آمريڪا ۾ مختلف منظم ڪيل ماکيءَ جا تجربا تيزيءَ سان ڪيا پيا وڃن، ۽ تازو ئي O. cornifrons19 لاءِ معياري پروٽوڪول تيار ڪيا ويا آهن.
سڱن واريون مکيون monocytes آهن ۽ تجارتي طور تي ڪارپ جي فصلن ۾ ماکي جي مکين جي اضافي يا متبادل طور استعمال ٿينديون آهن.اهي مکيون مارچ ۽ اپريل جي وچ ۾ نڪرنديون آهن، جن ۾ اڳڀرو نر ماديءَ کان ٽي چار ڏينهن اڳ نڪرندا آهن.ملن کان پوءِ، عورت فعال طور تي پولن ۽ نيڪار کي گڏ ڪري ٿي ته جيئن ٽوبلر نسٽ ڪيفيءَ (قدرتي يا مصنوعي) 1,20 ۾ بروڊ سيلز جو سلسلو مهيا ڪري.آنڊا سيلن جي اندر پولن تي رکيا ويندا آهن؛عورت پوءِ ايندڙ سيل تيار ڪرڻ کان اڳ مٽيءَ جي ڀت ٺاهي ٿي.پهريون انسٽار لاروا chorion ۾ بند ٿيل آهن ۽ جنين جي رطوبتن تي کارائيندا آهن.ٻئي کان پنجين انسٽار (پريپوپا) تائين، لاروا پولن 22 تي کارائيندا آهن.پولن جي فراهمي مڪمل طور تي ختم ٿيڻ کان پوء، لاروا هڪ ئي بروڊ چيمبر ۾، عام طور تي اونهاري جي آخر ۾، 20,23 جي آخر ۾، ڪوڪون، پيپيٽ ۽ بالغن جي طور تي ظاهر ٿيندا آهن.بالغن کي ايندڙ بهار ۾ ظاهر ٿئي ٿو.بالغن جي بقا جو تعلق خالص توانائي حاصل ڪرڻ سان آهي (وزن وڌائڻ) جي بنياد تي کاڌي جي استعمال جي بنياد تي.اهڙيءَ طرح، پولن جي غذائي معيار، گڏوگڏ ٻيا عنصر جيئن ته موسم يا جراثيم ڪش دوائن جي نمائش، بقا ۽ صحت24 جو تعين ڪندڙ آهن.
گل پوڻ کان اڳ لاڳو ڪيل حشرات ۽ فنگسائڊس ٻوٽن جي ويسڪليچر جي اندر مختلف درجن تائين منتقل ڪرڻ جي قابل آهن، ٽرانسليمينار کان (مثال طور، پنن جي مٿئين سطح کان هيٺئين سطح تائين منتقل ڪرڻ جي قابل، جهڙوڪ ڪجهه فنگسائڊس) 25 تائين واقعي سسٽماتي اثرات.، جيڪي پاڙن مان تاج ۾ داخل ٿي سگھن ٿا، سيب جي گلن جي امرت ۾ داخل ٿي سگھن ٿا، جتي اھي بالغن کي ماري سگھن ٿا.ڪي جراثيم مار دوائون پڻ پولن ۾ داخل ٿين ٿيون، جيڪي مڪئي جي لاروا جي ترقي کي متاثر ڪن ٿيون ۽ انهن جي موت جو سبب بڻجن ٿيون19.ٻين مطالعي مان معلوم ٿئي ٿو ته ڪجهه فنگسائڊس خاص طور تي لاڳاپيل جنس O. lignaria28 جي nesting رويي کي تبديل ڪري سگهن ٿا.ان کان علاوه، جراثيم ڪش جي نمائش واري منظرنامي (جنهن ۾ فنگسائڊس شامل آهن) کي نقل ڪندي ليبارٽري ۽ فيلڊ اڀياس ڏيکاريا آهن ته جراثيم مار دوائون جسماني 22 مورفولوجي 29 ۽ ماکيءَ جي مکين ۽ ڪجهه اڪيلائيءَ واري مکين جي بقا کي متاثر ڪن ٿيون.مختلف فنگسائيڊل اسپري جو سڌو سنئون کليل گلن تي گل پوڻ دوران بالغن پاران گڏ ڪيل پولن کي آلوده ڪري سگھن ٿا جيڪي لاروا جي ترقيءَ لاءِ آهن، جن جي اثرات جو اڀياس ڪيو وڃي ٿو30.
اهو وڌ ۾ وڌ تسليم ڪيو ويو آهي ته لاروا جي ترقي هاضمي سسٽم جي پولن ۽ مائڪروبيل برادرين تي اثر انداز ٿئي ٿي.ماکي جي مک جو مائڪرو بائيوم پيٽرول تي اثر انداز ٿئي ٿو جهڙوڪ باڊي ماس 31، ميٽابولڪ تبديليون22 ۽ پيٿوجنز 32 جي حساسيت.اڳوڻن مطالعي ۾ اڪيلائيء واري مکين جي مائڪروبيوم تي ترقياتي اسٽيج، غذائي اجزاء ۽ ماحول جي اثر جي جانچ ڪئي وئي آهي.انهن مطالعي مان ظاهر ڪيو ويو آهي ته لاروا ۽ پولن مائڪروبيومس جي ساخت ۽ گهڻائي ۾ هڪجهڙائي 33، انهي سان گڏ سڀ کان وڌيڪ عام بيڪٽيريا جي نسل Pseudomonas ۽ Delftia، اڪيلو ماکيء جي نسلن ۾.جيتوڻيڪ، جيتوڻيڪ فنگسائڊس جو تعلق ماکيءَ جي صحت جي حفاظت لاءِ حڪمت عملين سان ڪيو ويو آهي، پر سڌي زباني نمائش ذريعي لاروا مائڪرو بائيوٽا تي فنگسائيڊس جا اثر اڻپورا آهن.
هن مطالعي ۾ آمريڪا ۾ وڻ جي ميوي تي استعمال لاءِ رجسٽر ٿيل ڇهن عام استعمال ٿيل فنگسائيڊس جي حقيقي دنيا جي دوائن جي اثرن جي جانچ ڪئي وئي، جنهن ۾ رابطي ۽ سسٽماتي فنگسائڊس شامل آهن جيڪي آلودگي واري کاڌي مان مکڻ جي هارن ورم مٿ لاروا کي زباني طور تي منظم ڪيا ويا آهن.اسان ڏٺا ته رابطي ۽ سسٽماتي فنگسائڊس ماکيء جي جسم جي وزن ۾ گهٽتائي ۽ موت جي شرح وڌائي، مينڪوزيب ۽ پيريٿيائپائيڊ سان لاڳاپيل سڀ کان وڌيڪ سخت اثرات سان.ان کان پوء اسان مينڪوزيب جي علاج ٿيل پولن غذا تي استعمال ٿيندڙ لاروا جي مائڪروبيل تنوع جو مقابلو ڪيو جيڪي ڪنٽرول غذا تي کارايو ويو.اسان انٽيگريٽيڊ پيسٽ اينڊ پولينٽر مئنيجمينٽ (IPPM) 36 پروگرامن لاءِ موت جي شرح ۽ اثرن تي ٻڌل امڪاني ميڪانيزم تي بحث ڪريون ٿا.
بالغ O. Cornifrons overwintering cocoons ۾ فروٽ ريسرچ سينٽر، Biglerville, PA مان حاصل ڪيا ويا ۽ −3 کان 2 °C (±0.3 °C) تي محفوظ ڪيا ويا.تجربي کان اڳ (مجموعي طور تي 600 ڪوڪون).مئي 2022 ۾، 100 O. Cornifrons cocoons روزانو پلاسٽڪ جي ڪپن ۾ منتقل ڪيا ويا (50 cocoons per cup، DI 5 cm × 15 cm ڊگهو) ۽ وائپس کپن جي اندر رکيا ويا ته جيئن کولڻ کي وڌائڻ ۽ هڪ چيوائيبل سبسٽريٽ مهيا ڪيو وڃي، پٿرن تي دٻاءُ گهٽجي. مکيون 37 .ٻه پلاسٽڪ جا پيالا جن ۾ ڪوڪون شامل آهن هڪ حشرات جي پنجري ۾ (30 × 30 × 30 سينٽي ميٽر، بگ ڊارم ميگا وييو سائنس ڪمپني لميٽيڊ، تائيوان) 10 ملي ليٽر فيڊرز سان گڏ 50٪ سوڪروز جو حل ۽ چار ڏينهن تائين ذخيرو ڪريو ته جيئن بندش ۽ ميلاپ کي يقيني بڻائي سگهجي.23 ° سي، نسبتي نمي 60٪، فوٽوپيريڊ 10 l (گهٽ شدت): 14 ڏينهن.100 مليل مادين ۽ نر هر صبح ڇهن ڏينهن تائين (100 في ڏينهن) ٻن مصنوعي ڄارن ۾ ڇڏيا ويندا هئا جڏهن چوٽيءَ واري سيب جي گلن ۾ (ٽريپ نسٽ: ويڪر 33.66 × اوچائي 30.48 × ڊگھائي 46.99 سينٽي؛ ضمني شڪل 1).Pennsylvania State Arboretum تي رکيل، ويجھو چيري (Prunus cerasus 'Eubank' Sweet Cherry Pie™)، peach (Prunus persica 'Contender')، Prunus persica 'PF 27A' Flamin Fury®)، pear (Pyrus perifolia 'Olympic'، Pyrus) perifolia 'Sinko'، Pyrus perifolia 'Shinseiki'، co-op 30′ Enterprise™، Malus apple Tree 'Co-op 30′ Enterprise™، سيب جي وڻ جون ڪيتريون ئي قسمون (Malus coronaria) ۽ انب جي وڻن جون ڪيتريون ئي قسمون. Op 31′ Winecrisp™, begonia 'Freedom', Begonia 'Golden Delicious', Begonia 'Nova Spy').هر نيري پلاسٽڪ جي پکيءَ جو گهر ٻن ڪاٺ جي دٻين جي مٿي تي بيٺو آهي.هر نسٽ باڪس ۾ 800 خالي ڪرافٽ پيپر ٽيوب شامل آهن (سرپل کليل، 0.8 سينٽي ميٽر ID × 15 سينٽي ايل) (Jonesville Paper Tube Co., Michigan) مبهم سيلفين ٽيوبن ۾ داخل ٿيل آهن (0.7 OD ڏسو پلاسٽڪ پلگ (T-1X پلگ) نينٽنگ سائيٽ مهيا ڪن ٿا. .
ٻنهي نيسٽ باڪس جو منهن اوڀر طرف هو ۽ سائي پلاسٽڪ جي باغيچن سان ڍڪيل هئا (Everbilt ماڊل #889250EB12، اوپننگ سائيز 5 × 5 سينٽي، 0.95 m × 100 m) جيئن ته ڪُنڊ ۽ پکين جي پهچ کي روڪڻ لاءِ ۽ مٽي جي مٿاڇري تي نيسٽ باڪس جي مٽي جي اڳيان رکيا ويا. باڪسNest باڪس (ضمني شڪل 1a).مڪئي جا انڊا روزانو گڏ ڪيا ويندا هئا جن مان 30 ٽيوبون گڏ ڪري انهن کي ليبارٽري ڏانهن منتقل ڪيو ويندو هو.اسڪيسر استعمال ڪندي، ٽيوب جي آخر ۾ هڪ ڪٽ ٺاهيو، پوءِ سرپل ٽيوب کي ڌار ڪريو ته جيئن بروڊ سيلز کي بي نقاب ڪري سگهجي.انفرادي انڊا ۽ انهن جي پولن کي وکر اسپاتولا استعمال ڪندي هٽايو ويو (مائڪرو سلائيڊ ٽول ڪٽ، بايو ڪوپ پراڊڪٽس Inc.، ڪيليفورنيا).انڊن کي نم فلٽر پيپر تي لڳايو ويو ۽ اسان جي تجربن ۾ استعمال ٿيڻ کان پهريان 2 ڪلاڪ پيٽري ڊش ۾ رکيا ويا (ضمني شڪل 1b-d).
ليبارٽري ۾، اسان ڇهن فنگسائڊس جي زباني زهر جو اندازو لڳايو جيڪو انب جي ڦل کان اڳ ۽ ان دوران استعمال ڪيو ويو ٽن ڪنسنٽريشن (0.1X، 0.5X، ۽ 1X، جتي 1X اهو نشان آهي جيڪو هر 100 گيلن پاڻي/ايڪڙ تي لاڳو ڪيو ويو آهي. هاءِ فيلڊ دوز = ڪنسنٽريشن فيلڊ ۾).، ٽيبل 1).هر ڪنسنٽريشن 16 ڀيرا بار بار ڪيو ويو (n = 16).ٻه رابطي واري فنگسائڊس (ٽيبل S1: mancozeb 2696.14 ppm ۽ captan 2875.88 ppm) ۽ چار سسٽماتي fungicides (Table S1: pyrithiostrobin 250.14 ppm؛ trifloxystrobin 110.06 ppm؛ myclobutanil azole ppm 2.55.5.5.5 پي پي ايم). ميون، ڀاڄين ۽ آرائشي فصلن لاءِ .اسان گرائنڊر جي مدد سان پولن کي هڪجهڙو ڪيو، 0.20 گرام کي کوهه ۾ منتقل ڪيو (24-Wal Falcon Plate)، ۽ 1 μL فنگسائيڊ محلول کي شامل ڪيو ۽ ملايو ته پراميڊل پولن ٺاهيو جنهن ۾ 1 ملي ميٽر اونها کوهه رکيل هئا جن ۾ انڊا رکيل هئا.هڪ مني اسپاتولا استعمال ڪندي جڳهه (ضمني شڪل 1c، ڊي).Falcon پليٽون ڪمري جي گرمي پد (25 ° C) ۽ 70٪ نسبتا نمي تي محفوظ ڪيون ويون آهن.اسان انھن جو مقابلو ڪنٽرول لاروا سان ڪيو آھي جنھن کي خالص پاڻيءَ سان علاج ڪيو ويندو آھي.اسان موت جي شرح کي رڪارڊ ڪيو ۽ هر ٻئي ڏينهن لاروا جي وزن کي ماپيندا هئاسين جيستائين لاروا هڪ تجزياتي توازن (فشر سائنسي، درستگي = 0.0001 g) استعمال ڪندي اڳوڻو عمر تائين پهچي ويو.آخرڪار، 2.5 مهينن کان پوء ڪوڪون کولڻ سان جنسي تناسب جو جائزو ورتو ويو.
ڊي اين اي پوري O. ڪارنيفرون لاروا مان ڪڍيو ويو (n = 3 في علاج جي حالت، مينڪوزيب-علاج ٿيل ۽ غير علاج ٿيل پولن) ۽ اسان انهن نمونن تي مائڪروبيئل تنوع جا تجزيا ڪيا، خاص طور تي ڇاڪاڻ ته مينڪوزيب ۾ لاروا ۾ سڀ کان وڌيڪ موت جو مشاهدو ڪيو ويو.MnZn وصول ڪرڻ.DNA کي وڌايو ويو، DNAZymoBIOMICS®-96 MagBead DNA ڪٽ (Zymo Research, Irvine, CA) استعمال ڪندي صاف ڪيو ويو، ۽ هڪ Illumina® MiSeq™ تي ترتيب ڏنل (600 cycles) v3 ڪٽ استعمال ڪندي.بيڪٽيريا 16S ribosomal RNA جين جي ٽارگيٽ ڪيل ترتيب Quick-16S™ NGS لائبريري پريپ کٽ (Zymo Research, Irvine, CA) استعمال ڪندي ڪئي وئي پرائمر استعمال ڪندي 16S rRNA جين جي V3-V4 علائقي کي نشانو بڻائيندي.اضافي طور تي، 18S ترتيب 10٪ PhiX شموليت استعمال ڪندي ڪيو ويو، ۽ پرائمر جوڙو 18S001 ۽ NS4 استعمال ڪندي پرفارم ڪيو ويو.
QIIME2 پائپ لائن (v2022.11.1) استعمال ڪندي جوڙيل reads39 درآمد ۽ عمل ڪريو.اهي پڙهيا ويا ۽ ضم ڪيا ويا، ۽ چيميرڪ ترتيبن کي DADA2 پلگ ان استعمال ڪندي QIIME2 (qiime dada2 noise pairing) 40 ۾ هٽايو ويو.16S ۽ 18S ڪلاس اسائنمنٽس کي استعمال ڪيو ويو آبجیکٹ ڪلاسفير پلگ ان Classify-sklearn ۽ اڳ-تربيت ٿيل artifact silva-138-99-nb-classifier.
سڀني تجرباتي ڊيٽا جي چڪاس ڪئي وئي نارمليت (Shapiro-Wilks) ۽ مختلف قسمن جي هڪجهڙائي (Levene's test).ڇاڪاڻ ته ڊيٽا سيٽ پيراميٽرڪ تجزيي جي مفروضن کي پورو نه ڪيو ۽ تبديلي بقا کي معياري ڪرڻ ۾ ناڪام ٿي، اسان ٻن عنصرن [وقت (ٽي-مرحلو 2، 5، ۽ 8 ڏينهن) سان هڪ غير پيراميٽرڪ ٻه طرفي ANOVA (ڪرسڪل-والس) ڪيو. ٽائم پوائنٽس) ۽ فنگسائڊ] لاروا جي تازي وزن تي علاج جي اثر جو جائزو وٺڻ لاءِ، پوءِ وِلڪوڪسن ٽيسٽ کي استعمال ڪندي پوسٽ-هاڪ نان پيراميٽرڪ جوڙو جو مقابلو ڪيو ويو.اسان هڪ عام لينر ماڊل (GLM) استعمال ڪيو هڪ Poisson distribution سان گڏ فنگسائيڊز جي اثرن جو مقابلو ڪرڻ لاءِ ٽن فنگسائيڊ ڪنسنٽريشنز 41,42 تي بقا تي.فرق جي گھڻائي جي تجزيي لاء، amplicon sequence variants (ASVs) جو تعداد جينس جي سطح تي ختم ٿي ويو.16S (جينس ليول) ۽ 18S لاڳاپا اڪثريت استعمال ڪندي گروپن جي وچ ۾ فرق جي گھڻائي جو مقابلو ڪيو ويو بيٽا صفر-انفليٽ ٿيل (BEZI) خانداني تقسيم سان گڏ پوزيشن، پيماني ۽ شڪل (GAMLSS) لاءِ عام اضافو ماڊل استعمال ڪندي، جيڪي ميڪرو تي ماڊل ڪيا ويا. .مائڪروبيوم R43 ۾ (v1.1).1).مختلف تجزيي کان اڳ mitochondrial ۽ chloroplast نسلن کي هٽايو.ڇاڪاڻ ته 18S جي مختلف ٽيڪني سطحن جي ڪري، هر ٽيڪسن جي صرف هيٺين سطح کي استعمال ڪيو ويو مختلف تجزيي لاءِ.سڀ شمارياتي تجزيا استعمال ڪيا ويا R (v. 3.4.3.، CRAN پروجيڪٽ) (ٽيم 2013).
Mancozeb، pyrithiostrobin ۽ trifloxystrobin جي نمائش O. Cornifrons (تصوير 1) ۾ خاص طور تي جسم جي وزن ۾ اضافو گھٽائي ٿي.اهي اثر لڳاتار ڏٺا ويا سڀني ٽن دوزن جي لاءِ جو جائزو ورتو ويو (Fig. 1a-c).سائڪلوسٽروبين ۽ ميڪلوبوتانيل لاروا جي وزن ۾ خاص طور تي گهٽتائي نه ڪئي.
اسٽيم بورر لاروا جو سراسري تازو وزن ٽن وقتن پوائنٽن تي چار غذائي علاج هيٺ ماپيو ويو (هموجنس پولن فيڊ + فنگسائيڊ: ڪنٽرول، 0.1X، 0.5X ۽ 1X دوز).(a) گھٽ دوز (0.1X): پهريون ڀيرو پوائنٽ (ڏينهن 1): χ2: 30.99، DF = 6؛P <0.0001، سيڪنڊ ٽائيم پوائنٽ (ڏينهن 5): 22.83، ڊي ايف = 0.0009؛ٽيون ڀيرو؛پوائنٽ (ڏينهن 8): χ2: 28.39، DF = 6؛(b) اڌ دوز (0.5X): پهريون ڀيرو پوائنٽ (ڏينهن 1): χ2: 35.67، DF = 6؛P <0.0001، سيڪنڊ ٽائيم پوائنٽ (ڏينهن پهريون).): χ2: 15.98، ڊي ايف = 6؛پي = 0.0090؛ٽيون ٽائيم پوائنٽ (ڏينهن 8) χ2: 16.47، ڊي ايف = 6؛(c) سائيٽ يا مڪمل دوز (1X): پهريون ڀيرو پوائنٽ (ڏينهن 1) χ2: 20.64، P = 6؛P = 0.0326، سيڪنڊ ٽائيم پوائنٽ (ڏينهن 5): χ2: 22.83، DF = 6؛پي = 0.0009؛ٽيون ٽائيم پوائنٽ (ڏينهن 8): χ2: 28.39، DF = 6؛variance جو غير پيراميٽرڪ تجزيو.بار ڏيکارين ٿا ± SE جوڙو جي ڀيٽ ۾ (α = 0.05) (n = 16) *P ≤ 0.05، **P ≤ 0.001، ***P ≤ 0.0001.
گھٽ ۾ گھٽ دوز (0.1X) تي، لاروا جي جسم جو وزن گھٽجي ويو 60% trifloxystrobin سان، 49% mancozeb سان، 48% myclobutanil سان، ۽ 46% pyrithistrobin سان (Fig. 1a).جڏهن اڌ فيلڊ دوز (0.5X) کي ظاهر ڪيو ويو، مينڪوزيب لاروا جي جسماني وزن ۾ 86٪، پيريٿيوسٽروبن 52٪ ۽ ٽرائي فلوڪسسٽروبين 50٪ (تصوير 1b) گھٽجي ويو.مينڪوزيب جي هڪ مڪمل فيلڊ دوز (1X) لاروا وزن ۾ 82٪، پيريٿيوسٽروبن 70٪، ۽ trifloxystrobin، myclobutanil ۽ سانگارڊ تقريبن 30٪ گھٽائي ٿو (تصوير 1c).
موت جي شرح سڀ کان وڌيڪ هئي لاروا کي کارائڻ مانڪوزيب سان علاج ٿيل پولن، ان کان پوءِ پيريٿيوسٽروبن ۽ ٽرائي فلوڪسيسٽروبين.مئنڪوزيب ۽ پائريٽيسولين (تصوير 2؛ ٽيبل 2) جي وڌندڙ دوز سان موت جي شرح وڌي وئي.جڏهن ته، مکڻ جي ٻج جي موت جي شرح صرف ٿورو وڌي وئي آهي جيئن ٽرائي فلوڪسسٽروبين جي مقدار ۾ واڌارو؛cyprodinil ۽ captan خاص طور تي ڪنٽرول علاج جي مقابلي ۾ موت جي شرح ۾ اضافو نه ڪيو.
بورر فلائي لاروا جي موت جو مقابلو پولن جي انجڻ کان پوءِ ڪيو ويو جنهن جو انفرادي طور تي ڇهن مختلف فنگسائيڊس سان علاج ڪيو ويو.Mancozeb ۽ pentopyramide مکڻ جي ميگٽس جي زباني نمائش لاء وڌيڪ حساس هئا (GLM: χ = 29.45، DF = 20، P = 0.0059) (لائن، سلوپ = 0.29، P <0.001؛ سلپ = <0.24، P).
سراسري طور تي، سڀني علاجن ۾، 39.05٪ مريض عورتون ۽ 60.95٪ مرد هئا.ڪنٽرول علاج جي وچ ۾، عورتن جو تناسب 40٪ ٻنهي گهٽ-دوز (0.1X) ۽ اڌ-دوز (0.5X) مطالعي ۾، ۽ 30٪ فيلڊ-دوز (1X) مطالعي ۾.0.1X دوز تي، pollen-fed larvae مان جن جو علاج mancozeb ۽ myclobutanil سان ڪيو ويو، 33.33٪ بالغ عورتون، 22٪ بالغ عورتون، 44٪ بالغ لاروا عورتون، 44٪ بالغ لاروا عورتون هيون.عورت، بالغ لاروا جو 41٪ عورتون هيون، ۽ ڪنٽرول 31٪ هئا (تصوير 3a).0.5 دوز جي ڀيٽ ۾، مينڪوزيب ۽ پيريٿيوسٽروبن گروپ ۾ بالغن ۾ 33٪ عورتون، 36٪ trifloxystrobin گروپ ۾، 41٪ myclobutanil گروپ ۾، ۽ 46٪ cyprostrobin گروپ ۾.اهو انگ 53٪ گروپ ۾ هو.ڪئپٽن گروپ ۾ ۽ 38٪ ڪنٽرول گروپ ۾ (تصوير 3b).1X دوز تي، مينڪوزيب گروپ جو 30٪ عورتون هيون، 36٪ پيريٿيوسٽروبين گروپ، 44٪ ٽرائي فلوڪسسٽروبين گروپ، 38٪ ميڪلوبوٽينل گروپ، 50٪ ڪنٽرول گروپ عورتون هيون - 38.5٪ (تصوير 3c) .
لاروا اسٽيج فنگسائڊ ​​جي نمائش کان پوءِ عورتن ۽ نر بورن جو سيڪڙو.(a) گھٽ دوز (0.1X).(b) اڌ دوز (0.5X).(c) فيلڊ دوز يا مڪمل دوز (1X).
16S تسلسل جي تجزيي مان معلوم ٿئي ٿو ته بيڪٽيريا گروپ مينڪوزيب جي علاج ٿيل پولن سان کارائڻ واري لاروا ۽ غير علاج ٿيل پولن سان کارائڻ واري لاروا جي وچ ۾ فرق آهي (تصوير 4a).غير علاج ٿيل لاروا جو مائيڪروبيل انڊيڪس پولن تي کارائڻ وارن لاروا جي ڀيٽ ۾ وڌيڪ هو جيڪو مينڪوزيب جي علاج ٿيل پولن تي کارايو ويو هو (تصوير 4b).جيتوڻيڪ گروهن جي وچ ۾ اميريت ۾ ڏٺو ويو فرق شمارياتي لحاظ کان اهم نه هو، پر اهو ان کان گهڻو گهٽ هو، جيڪو غير علاج ٿيل پولن (Fig. 4c) تي لاروا کي کارائڻ لاءِ ڏٺو ويو هو.لاڳاپي جي گهڻائي ڏيکاري ٿي ته ڪنٽرول پولن تي کارائڻ واري لاروا جو مائڪرو بائيوٽا مينڪوزيب جي علاج ٿيل لاروا (Fig. 5a) تي کارائڻ واري لاروا جي ڀيٽ ۾ وڌيڪ متنوع هو.تشريحاتي تجزيو ظاهر ڪيو ته ڪنٽرول ۾ 28 نسلن جي موجودگي ۽ مينڪوزيب سان علاج ٿيل نمونن (تصوير 5b).c 18S تسلسل کي استعمال ڪندي تجزيي ۾ ڪو به اهم فرق ظاهر نه ڪيو ويو (ضمني شڪل 2).
SAV پروفائلز جي بنياد تي 16S جي ترتيبن جي مقابلي ۾ شانن جي اميرن سان مقابلو ڪيو ويو ۽ فيلم سطح تي اميري جو مشاهدو ڪيو ويو.(a) پرنسپل ڪوآرڊينيٽ تجزيو (PCoA) مجموعي مائڪروبيل ڪميونٽي ڍانچي جي بنياد تي غير علاج ٿيل پولن فيڊ يا ڪنٽرول (نيرو) ۽ مينڪوزيب فيڊ لاروا (نارنگي).هر ڊيٽا پوائنٽ هڪ الڳ نموني جي نمائندگي ڪري ٿو.PCoA ملائي ويريٽ ٽي تقسيم جي Bray-Curtis فاصلي کي استعمال ڪندي حساب ڪيو ويو.اوول 80٪ اعتماد جي سطح جي نمائندگي ڪن ٿا.(b) Boxplot، خام شانن مال ڊيٽا (پوائنٽس) ۽ ج.مشاهدو مال.باڪس پلاٽ وچين لڪير لاءِ باڪس ڏيکاريو، انٽرڪوارٽائل رينج (IQR)، ۽ 1.5 × IQR (n = 3).
مينڪوزيب جي علاج ٿيل ۽ غير علاج ٿيل پولن تي کارائڻ واري لاروا جي مائڪروبيل برادرين جو ٺهيل.(الف) لاڙ ۾ مائڪروبيل جينرا پڙهڻ جي نسبتي گهڻي مقدار.(b) سڃاڻپ مائڪروبيل برادرين جو گرمي نقشو.ڊيلفٽيا (اوڊس ريشو (OR) = 0.67، P = 0.0030) ۽ Pseudomonas (OR = 0.3، P = 0.0074)، مائڪرو بيڪٽيريا (OR = 0.75، P = 0.0617) (OR = 1.5، P = 0.0060)؛گرمي نقشي جون قطارون باهمي مفاصلي ۽ اوسط رابطي کي استعمال ڪندي ڪلستر ٿيل آهن.
اسان جا نتيجا ظاهر ڪن ٿا ته رابطي (مانڪوزيب) ۽ سسٽماتي (پيروسٽروبن ۽ ٽرائي فلوڪسسٽروبين) فنگسائڊس جي زباني نمائش، وڏي پيماني تي گلن جي دوران استعمال ڪئي وئي، خاص طور تي وزن ۾ گهٽتائي ۽ مڪئي جي لاروا جي موت ۾ اضافو ٿيو.ان کان علاوه، مينڪوزيب خاص طور تي اڳوڻي اسٽيج دوران مائڪروبيوم جي تنوع ۽ دولت کي گھٽائي ڇڏيو.Myclobutanil، هڪ ٻيو سسٽماتي فنگسائڊ، تمام ٽن دوزن ۾ لاروا جي جسم جي وزن ۾ خاص طور تي گهٽتائي.اهو اثر ٻئي (ڏينهن 5) ۽ ٽيون (ڏينهن 8) ٽائيم پوائنٽن تي ظاهر ٿيو.ان جي ابتڙ، سائپروڊينيل ۽ ڪئپٽن خاص طور تي وزن وڌائڻ يا بقا کي ڪنٽرول گروپ جي مقابلي ۾ گھٽ نه ڪيو.اسان جي ڄاڻ موجب، هي ڪم پهريون آهي جيڪو مختلف فنگسائيڊس جي فيلڊ جي شرحن جي اثرن کي طئي ڪرڻ لاءِ استعمال ڪيو ويو آهي جيڪي ڪڻڪ جي فصلن کي سڌو پولن جي نمائش ذريعي بچائڻ لاءِ استعمال ڪيا ويندا آهن.
سڀ فنگسائڊ ​​علاج خاص طور تي ڪنٽرول علاج جي مقابلي ۾ جسم جي وزن ۾ اضافو گھٽائي ٿو.منڪوزيب جو سڀ کان وڏو اثر لاروا جي جسم جي وزن ۾ اوسط 51 سيڪڙو جي گهٽتائي سان ٿيو، جنهن بعد پيريٿيوسٽروبين.بهرحال، ٻين اڀياسن ۾ لاڙ جي مرحلن 44 تي فنگسائيڊس جي فيلڊ دوائن جي خراب اثرن جي رپورٽ نه ڪئي وئي آهي.جيتوڻيڪ dithiocarbamate biocides ڏيکاريا ويا آهن ته گهٽ ايڪٽ toxicity 45، ethylene bisdithiocarbamates (EBDCS) جهڙوڪ مينڪوزيب يوريا ethylene سلفائيڊ کي خراب ڪري سگھن ٿا.ٻين جانورن ۾ ان جي mutagenic اثرات کي ڏنو ويو، هي تباهي واري پيداوار شايد مشاهدو اثرات 46,47 لاء ذميوار آهي.اڳوڻي اڀياس ڏيکاريا آهن ته ethylene thiourea جي ٺهڻ تي اثر انداز ٿئي ٿو جهڙوڪ بلند درجه حرارت48، نمي جي سطح 49 ۽ پيداوار جي اسٽوريج جي ڊيگهه 50.بايوائيڊس لاء مناسب اسٽوريج حالتون انهن ضمني اثرات کي گھٽائي سگهن ٿيون.ان کان علاوه، يورپي فوڊ سيفٽي اٿارٽي pyrithiopide جي زهر جي باري ۾ ڳڻتي جو اظهار ڪيو آهي، جيڪو ٻين جانورن جي هاضمي سسٽم لاء ڪارڪينجينڪ ثابت ڪيو ويو آهي51.
Mancozeb، pyrithiostrobin، ۽ trifloxystrobin جو زباني استعمال مکڻ جي بورر لاروا جي موت جي شرح وڌائي ٿو.ان جي ابتڙ، myclobutanil، ciprocycline ۽ captan موت جي شرح تي ڪو به اثر نه ڪيو.اهي نتيجا Ladurner et al.52 کان مختلف آهن، جن ظاهر ڪيو ته ڪئپٽن بالغن جي O. lignaria ۽ Apis mellifera L. (Hymenoptera، Apisidae) جي بقا کي خاص طور تي گهٽائي ڇڏيو.ان کان علاوه، فنگسائڊس جهڙوڪ ڪيپٽن ۽ بوسڪالڊ پڻ مليا آهن جيڪي لاروا جي موت جو سبب بڻجن ٿيون 52,53,54 يا خوراڪ جي رويي کي تبديل ڪن ٿيون55.اهي تبديليون، موڙ ۾، پولن جي غذائي معيار ۽ آخرڪار لاروا اسٽيج جي توانائي حاصل ڪرڻ تي اثر انداز ڪري سگهن ٿيون.ڪنٽرول گروپ ۾ موت جو مشاهدو ڪيو ويو ٻين مطالعي سان 56,57.
اسان جي ڪم ۾ ڏٺو ويو نر-پسند جنس جو تناسب عنصرن جي ذريعي وضاحت ڪري سگهجي ٿو جهڙوڪ ناکافي ميلاپ ۽ گلن جي دوران خراب موسمي حالتون، جيئن اڳ ۾ وائيسنس ۽ بوش پاران O. cornuta لاءِ تجويز ڪيل آهي.جيتوڻيڪ اسان جي مطالعي ۾ عورتن ۽ مردن کي چار ڏينهن ملن ٿا (هڪ عرصو عام طور تي ڪامياب ميٽنگ لاءِ ڪافي سمجهيو ويندو آهي)، اسان جان بوجھائي روشنيءَ جي شدت کي گهٽايو ته دٻاءُ کي گهٽائڻ لاءِ.بهرحال، هي تبديلي غير ارادي طور تي ملن جي عمل ۾ مداخلت ڪري سگهي ٿي61.ان کان علاوه، مکڻ ڪيترن ئي ڏينهن جي خراب موسم جو تجربو ڪري ٿو، جنهن ۾ مينهن ۽ گهٽ درجه حرارت (<5°C) شامل آهن، جيڪي پڻ ملن جي ڪاميابي تي منفي اثر انداز ڪري سگهن ٿا 4,23.
جيتوڻيڪ اسان جو مطالعو سڄو لاروا مائڪروبيوم تي مرکوز ڪيو ويو، اسان جا نتيجا بيڪٽيريا برادرين جي وچ ۾ امڪاني رشتي جي باري ۾ بصيرت مهيا ڪن ٿا جيڪي شايد ماکيء جي غذائيت ۽ فنگسائڊ ​​جي نمائش لاء اهم هوندا.مثال طور، لاروا کي کارايو ويو مينڪوزيب جو علاج ٿيل پولن خاص طور تي مائڪروبيل ڪميونٽي جي جوڙجڪ ۽ گھڻائي کي گھٽائي ڇڏيو هو ان جي مقابلي ۾ لاروا کي کارايو ويو غير علاج ٿيل پولن.غير علاج ٿيل پولن کي استعمال ڪندڙ لاروا ۾، بيڪٽيريا گروپ پروٽو بيڪٽيريا ۽ ايٽينو بيڪٽيريا غالب هئا ۽ گهڻو ڪري ايروبڪ يا فيڪٽري طور تي ايروبڪ هئا.ڊيلفٽ بيڪٽيريا، عام طور تي اڪيلائيءَ واري ماکيءَ جي نسلن سان جڙيل آهن، جن کي اينٽي بائيوٽڪ سرگرميءَ لاءِ ڄاتو وڃي ٿو، جيڪو روڳن جي خلاف هڪ امڪاني حفاظتي ڪردار جي نشاندهي ڪري ٿو.هڪ ٻي بيڪٽيريا جي نسل، Pseudomonas، لاڙ جي علاج نه ٿيل پولن ۾ گهڻي مقدار ۾ هئي، پر مينڪوزيب جي علاج ٿيل لاروا ۾ گهڻو گهٽجي وئي.اسان جا نتيجا اڳوڻن مطالعي جي حمايت ڪن ٿا جن ۾ Pseudomonas جي سڃاڻپ O. bicornis35 ۽ ٻين solatary wasps34 ۾ سڀ کان وڌيڪ گهڻائي نسلن مان هڪ آهي.جيتوڻيڪ O. cornifrons جي صحت ۾ Pseudomonas جي ڪردار لاءِ تجرباتي ثبوتن جو اڀياس نه ڪيو ويو آهي، هي بيڪٽيريا بيٽل Paederus fuscipes ۾ حفاظتي زهر جي ترڪيب کي فروغ ڏيڻ ۽ ويٽرو 35، 65 ۾ ارجنائن ميٽابولزم کي فروغ ڏيڻ لاءِ ڏيکاريو ويو آهي. O. Cornifrons larvae جي ترقي جي وقت ۾ وائرل ۽ بيڪٽيريا جي حفاظت ۾ هڪ امڪاني ڪردار.Microbacterium هڪ ٻي جينس آهي جنهن جي نشاندهي اسان جي مطالعي ۾ ڪئي وئي آهي جنهن کي ٻڌايو ويو آهي ته ڪارو سپاهي فلائي لاروا ۾ وڏي تعداد ۾ موجود آهي بک جي حالتن هيٺ.O. Cornifrons لاروا ۾، مائڪرو بيڪٽيريا شايد دٻاء جي حالتن ۾ گٽ مائڪروبيوم جي توازن ۽ لچڪ ۾ حصو وٺن.اضافي طور تي، Rhodococcus O. cornifrons larvae ۾ ملي ٿو ۽ ان جي detoxification جي صلاحيتن جي ڪري مشهور آهي67.هي نسل A. florea جي گٽ ۾ پڻ ملي ٿو، پر تمام گهٽ مقدار ۾ 68.اسان جا نتيجا ڪيترن ئي مائڪروبيل ٽيڪسا ۾ ڪيترن ئي جينياتي تغيرات جي موجودگي کي ظاهر ڪن ٿا جيڪي لاروا ۾ ميٽابولڪ عمل کي تبديل ڪري سگھن ٿا.تنهن هوندي به، O. cornifrons جي فنڪشنل تنوع کي بهتر سمجهڻ جي ضرورت آهي.
تت ۾، نتيجن مان ظاهر ٿئي ٿو ته مينڪوزيب، پيريٿيوسٽروبين ۽ ٽرائي فلوڪسسٽروبين جسم جي وزن ۾ گهٽتائي ۽ مکڻ جي بورر لاروا جي موت جي شرح کي وڌايو.جيتوڻيڪ پولينٽرز تي فنگسائڊس جي اثرن بابت خدشات وڌي رهيا آهن، انهن مرکبن جي بقايا ميٽابولائٽس جي اثرات کي بهتر سمجهڻ جي ضرورت آهي.انهن نتيجن کي مربوط پولينٽر مئنيجمينٽ پروگرامن جي سفارشن ۾ شامل ڪري سگهجي ٿو جيڪي هارين کي ڪجهه فنگسائيڊس جي استعمال کان بچڻ ۾ مدد ڪن ٿا ميوي جي وڻ جي گلن کان اڳ ۽ دوران فنگسائڊس جي چونڊ ڪندي ۽ استعمال جي وقت ۾ فرق ڪندي، يا گهٽ نقصانڪار متبادل جي استعمال جي حوصلا افزائي ڪندي 36. هي معلومات. سفارشن جي ترقي لاء اهم آهي.جراثيمن جي استعمال تي، جيئن ته موجوده اسپري پروگرامن کي ترتيب ڏيڻ ۽ اسپري جي وقت کي تبديل ڪرڻ جڏهن فنگسائڊس کي چونڊيو وڃي يا گهٽ خطرناڪ متبادل جي استعمال کي وڌايو وڃي.وڌيڪ تحقيق جي ضرورت آهي فنگسائڊس جي جنس جي تناسب تي منفي اثرات، کاڌ خوراڪ جي رويي، گٽ مائڪروبيوم، ۽ ماليڪيول ميکانيزم جيڪي ڪنن بورر جي وزن جي گھٽتائي ۽ موت جي بنياد تي.
ماخذ ڊيٽا 1، 2 ۽ 3 ۾ انگ 1 ۽ 2 ۾ جمع ڪيو ويو آهي figshare ڊيٽا جي ذخيري ۾ DOI: https://doi.org/10.6084/m9.figshare.24996245 ۽ https://doi.org/10.6084/m9.figshare.24996233.موجوده مطالعي ۾ تجزيو ڪيل تسلسل (Figs. 4, 5) NCBI SRA مخزن ۾ دستياب نمبر PRJNA1023565 تحت موجود آهن.
بوش، جي. ۽ ڪيمپ، WP ڊولپمينٽ ۽ اسٽيبلشمينٽ آف هوني بي اسپيسيز جيئن زرعي فصلن جي pollinators: جينس اوسميا جو مثال.(Hymenoptera: Megachilidae) ۽ ميوا وڻ.ٻلينٽومور.وسيلو.92، 3-16 (2002).
پارڪر، ايم جي وغيره.نيو يارڪ ۽ پنسلوانيا ۾ سيب پوکڻ وارن جي وچ ۾ پولينيشن جا طريقا ۽ متبادل پولينٽر جا تصور.تازه ڪاري.زراعت.کاڌي جي نظام.35، 1-14 (2020).
Koch I.، Lonsdorf EW، Artz DR، Pitts-Singer TL ۽ Ricketts TH Ecology and Economics of almond pollination using native bees.جي. اقتصاديات.نٽومور.111، 16-25 (2018).
لي، اي، هي، يو، ۽ پارڪ، يو-ايل.ٽريگوپن فينولوجي تي موسمياتي تبديلي جا اثر: آبادي جي انتظام لاءِ اثر.چڙهڻ.تبديل ڪريو 150، 305–317 (2018).
Artz، DR ۽ Pitts-Singer، TL Effect of fungicide and adjuvant sprays on the nesting behavior of two managed solitary bees (Osmia lignaria and Megachile rotundata).PloS One 10، e0135688 (2015).
Beauvais، S. et al.هڪ گهٽ زهريلي فصل جي فنگسائيڊ (فينبوڪونازول) مردن جي پيداواري معيار جي سگنلن ۾ مداخلت ڪري ٿي جنهن جي نتيجي ۾ جهنگلي اڪيلائي مکين ۾ ميٽنگ جي ڪاميابي گهٽجي ٿي.جي ايپس.ماحوليات.59، 1596-1607 (2022).
Sgolastra F. et al.Neonicotinoid insecticides ۽ ergosterol biosynthesis ٽن مکين جي نسلن ۾ synergistic fungicide موت جي شرح کي دٻائي ٿو.جيت مار.سائنس.73، 1236-1243 (2017).
Kuhneman JG، Gillung J، Van Dyck MT، Fordyce RF.۽ ڊانفورٿ بي اين سوليٽري ويسپ لاروا جراثيم جي تنوع کي تبديل ڪري ٿو جيڪو پولن پاران فراهم ڪيل اسٽيم-نسٽنگ بيز اوسميا ڪارنيفرون (ميگاچليڊي) کي.سامهون.microorganism.13، 1057626 (2023).
Dharampal PS، Danforth BN ۽ Steffan SA خمير ٿيل پولن ۾ ectosymbiotic microorganisms اڪيلي ماکيءَ جي ترقيءَ لاءِ ايترو ئي اهم آهن، جيترو خود پولن.ماحوليات.ارتقا.12. e8788 (2022).
ڪلڊرر ايم، مانيڪي ايل ايم، ڪيپوٽو ايف ۽ ٿالائيمر ايم. انب-رو پوکنگ ان ايپل جي باغن کي ڪنٽرول ڪرڻ لاءِ ريزيڊنگ بيمارين: هڪ عملي اثرائتو مطالعو مائڪروبيل اشارن جي بنياد تي.ٻوٽي جي مٽي 357، 381-393 (2012).
مارٽن پي ايل، ڪروچڪ ٽي.، خدادادي ايف.، اچمووچ ايس جي ۽ پيٽر KA بيٽر روٽ آف ايپلز ان دي مڊ ائٽلانٽڪ آمريڪا: اسيسمينٽ آف causative species and the impact of regional weather conditions and cultivar susceptibility.ڦوٽوپيٿولوجي 111، 966-981 (2021).
ڪولن ايم جي، ٿامپسن ايل جي، کيرولن جي جي، اسٽوٽ جي جي.۽ اسٽينلي ڊي اي فنگسائڊس، هيبائڊس ۽ بيز: موجوده تحقيق ۽ طريقن جو هڪ منظم جائزو.PLOS One 14، e0225743 (2019).
پِلنگ، اي ڊي ۽ جيپسن، پي سي جي هم وقت سازي اثرات EBI fungicides ۽ pyrethroid insecticides on honey bees (Apis mellifera).سائنس کي نقصان پهچائي ٿو.39، 293-297 (1993).
Mussen, EC, Lopez, JE and Peng, CY Effect of Selected fungicides on the growth and development of honey be larvae Apis mellifera L. (Hymenoptera: Apidae).اربع.نٽومور.33، 1151-1154 (2004).
وان ڊائڪ، ايم.، مولن، اي.، وِڪسٽڊ، ڊي.، ۽ ميڪ آرٽ، ايس. ڊڪشنري گائيڊ فار پيسٽسائڊ استعمال لاءِ پروٽيڪيٽ پولينٽرز ان ٽري باغن ۾ (ڪارنيل يونيورسٽي، 2018).
Iwasaki، JM ۽ Hogendoorn، K. بيس جي نمائش غير جراثيم ڪش دوائن ڏانهن: طريقن جو جائزو ۽ رپورٽ ڪيل نتيجا.زراعت.ماحولياتي نظام.اربع.314، 107423 (2021).
Kopit AM، ڪلنگر اي، Cox-Foster DL، Ramirez RA.۽ Pitts-Singer TL آف سپلائي جي قسم ۽ جراثيمن جي نمائش جو اثر اوسميا لگنريا (Hymenoptera: Megachilidae) جي لاروا ڊولپمينٽ تي.اربع.نٽومور.51، 240-251 (2022).
Kopit AM ۽ Pitts-Singer TL پاٿ ويز آف پيسٽيائڊ ايڪسپوزر جو اڪيلائي خالي آڱوٺي مکين کي.اربع.نٽومور.47، 499-510 (2018).
پين، اين ٽي وغيره.بالغ جاپاني باغن جي مکين (اسميا ڪارنيفرون) ۾ جراثيمن جي زهر جو اندازو لڳائڻ لاءِ هڪ نئون انجڻ بايواسي پروٽوڪول.سائنس.رپورٽون 10، 9517 (2020).